生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
97-101
,共5页
绿色荧光蛋白(GFP)%四环素阻遏蛋白(TetR)%荧光光谱%荧光强度%融合蛋白%四环素生物传感器
綠色熒光蛋白(GFP)%四環素阻遏蛋白(TetR)%熒光光譜%熒光彊度%融閤蛋白%四環素生物傳感器
록색형광단백(GFP)%사배소조알단백(TetR)%형광광보%형광강도%융합단백%사배소생물전감기
将来源于水母的绿色荧光蛋白基因(gfp)和来源于E.coli转座子Tn10的四环素阻遏蛋白基因(tetR)共同构建到E.coli表达载体pET-30a+上,获得TetR C-端与GFP N-端融合蛋白.对经诱导表达并纯化后的融合蛋白(TR::GFP)进行荧光发射光谱分析表明,该融合蛋白保留了GFP的荧光特性,即在395 nm激发下,可在510 nn附近有特征发射峰.在加入四环素后,融合蛋白在395 nm激发下,在400 nm～700nm范围内的发射光谱发生明显变化,荧光强度普遍增加,且以510 nm处最大发射峰增幅最大,由原来1.132增至2.214,而四环素对相同浓度的GFP与TetR荧光影响不大,结果表明该融合蛋白,能感受外界四环素,并产生一定的荧光变化.
將來源于水母的綠色熒光蛋白基因(gfp)和來源于E.coli轉座子Tn10的四環素阻遏蛋白基因(tetR)共同構建到E.coli錶達載體pET-30a+上,穫得TetR C-耑與GFP N-耑融閤蛋白.對經誘導錶達併純化後的融閤蛋白(TR::GFP)進行熒光髮射光譜分析錶明,該融閤蛋白保留瞭GFP的熒光特性,即在395 nm激髮下,可在510 nn附近有特徵髮射峰.在加入四環素後,融閤蛋白在395 nm激髮下,在400 nm～700nm範圍內的髮射光譜髮生明顯變化,熒光彊度普遍增加,且以510 nm處最大髮射峰增幅最大,由原來1.132增至2.214,而四環素對相同濃度的GFP與TetR熒光影響不大,結果錶明該融閤蛋白,能感受外界四環素,併產生一定的熒光變化.
장래원우수모적록색형광단백기인(gfp)화래원우E.coli전좌자Tn10적사배소조알단백기인(tetR)공동구건도E.coli표체재체pET-30a+상,획득TetR C-단여GFP N-단융합단백.대경유도표체병순화후적융합단백(TR::GFP)진행형광발사광보분석표명,해융합단백보류료GFP적형광특성,즉재395 nm격발하,가재510 nn부근유특정발사봉.재가입사배소후,융합단백재395 nm격발하,재400 nm～700nm범위내적발사광보발생명현변화,형광강도보편증가,차이510 nm처최대발사봉증폭최대,유원래1.132증지2.214,이사배소대상동농도적GFP여TetR형광영향불대,결과표명해융합단백,능감수외계사배소,병산생일정적형광변화.
