生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2009年
z1期
300-304
,共5页
甄艳红%韩丽%梁爱心%王庆玲%杨利国
甄豔紅%韓麗%樑愛心%王慶玲%楊利國
견염홍%한려%량애심%왕경령%양리국
减毒沙门氏菌%抑制素(INH)%基因重组%基因免疫
減毒沙門氏菌%抑製素(INH)%基因重組%基因免疫
감독사문씨균%억제소(INH)%기인중조%기인면역
为了分析研究含抑制素重组质粒pVAX-IS-asd(以下简写为pXAIS)的crp(cAMP受体蛋白)和asd(天冬氨酸β-半乳搪脱氢酶)基因双缺失猪霍乱沙门氏菌C500菌株的遗传稳定性.方法:将现有的无抗性抑制素重组表达质粒pXAIS转化入crp和asd基因双缺失猪霍乱沙门氏菌C500菌株(简称"空质粒株")中,得"含质粒株".将"含质粒株"细菌在无选择压力条件下传代培养50代.利用酶切鉴定方法,分析"含质粒株"细菌中抑制素pXA/S质粒的稳定性;利用PCR方法扩增菌株("含质粒株"和"空质粒株")保守序列中invA基因,分析各代细菌的invA基因稳定性;通过比较传代培养后各代细菌的生长图型,分析"含质粒株"细菌传代后的生长规律.结果表明,"含质粒株"细菌连续传代50次后,仍能检出pXAIS质粒和invA基因,而且生长规律与"空质粒株"没有明显差异.说明含pXAIS质粒的猪霍乱沙门氏菌crp和asd基因双缺失株具有良好的遗传稳定性.
為瞭分析研究含抑製素重組質粒pVAX-IS-asd(以下簡寫為pXAIS)的crp(cAMP受體蛋白)和asd(天鼕氨痠β-半乳搪脫氫酶)基因雙缺失豬霍亂沙門氏菌C500菌株的遺傳穩定性.方法:將現有的無抗性抑製素重組錶達質粒pXAIS轉化入crp和asd基因雙缺失豬霍亂沙門氏菌C500菌株(簡稱"空質粒株")中,得"含質粒株".將"含質粒株"細菌在無選擇壓力條件下傳代培養50代.利用酶切鑒定方法,分析"含質粒株"細菌中抑製素pXA/S質粒的穩定性;利用PCR方法擴增菌株("含質粒株"和"空質粒株")保守序列中invA基因,分析各代細菌的invA基因穩定性;通過比較傳代培養後各代細菌的生長圖型,分析"含質粒株"細菌傳代後的生長規律.結果錶明,"含質粒株"細菌連續傳代50次後,仍能檢齣pXAIS質粒和invA基因,而且生長規律與"空質粒株"沒有明顯差異.說明含pXAIS質粒的豬霍亂沙門氏菌crp和asd基因雙缺失株具有良好的遺傳穩定性.
위료분석연구함억제소중조질립pVAX-IS-asd(이하간사위pXAIS)적crp(cAMP수체단백)화asd(천동안산β-반유당탈경매)기인쌍결실저곽란사문씨균C500균주적유전은정성.방법:장현유적무항성억제소중조표체질립pXAIS전화입crp화asd기인쌍결실저곽란사문씨균C500균주(간칭"공질립주")중,득"함질립주".장"함질립주"세균재무선택압력조건하전대배양50대.이용매절감정방법,분석"함질립주"세균중억제소pXA/S질립적은정성;이용PCR방법확증균주("함질립주"화"공질립주")보수서렬중invA기인,분석각대세균적invA기인은정성;통과비교전대배양후각대세균적생장도형,분석"함질립주"세균전대후적생장규률.결과표명,"함질립주"세균련속전대50차후,잉능검출pXAIS질립화invA기인,이차생장규률여"공질립주"몰유명현차이.설명함pXAIS질립적저곽란사문씨균crp화asd기인쌍결실주구유량호적유전은정성.