石河子大学学报(自然科学版)
石河子大學學報(自然科學版)
석하자대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SHIHEZI UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2009年
4期
470-473
,共4页
王菊%符毓豪%谢松松%周宗瑶
王菊%符毓豪%謝鬆鬆%週宗瑤
왕국%부육호%사송송%주종요
精原干细胞%小鼠%原代培养%体外研究
精原榦細胞%小鼠%原代培養%體外研究
정원간세포%소서%원대배양%체외연구
建立一种简单、有效体外分离和培养精原干细胞(spermatogonia stem cell,SSCs)的方法.采用酶消化6~8d新生小鼠睾丸制备睾丸细胞悬液后进行培养,碱性磷酸酶(AKP)染色和间接免疫荧光对培养的细胞进行鉴定;结果显示:SSCs培养3~5天可观察到细胞克隆的产生,AKP染色强阳性;间接免疫荧光显示GCNF阴性,oct-4、c-kil均呈阳性反应.由此可知以DMEM+15%胎牛血清+白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)+L-谷氨酰胺等为培养基,成功建立了精原干细胞的体外培养体系.
建立一種簡單、有效體外分離和培養精原榦細胞(spermatogonia stem cell,SSCs)的方法.採用酶消化6~8d新生小鼠睪汍製備睪汍細胞懸液後進行培養,堿性燐痠酶(AKP)染色和間接免疫熒光對培養的細胞進行鑒定;結果顯示:SSCs培養3~5天可觀察到細胞剋隆的產生,AKP染色彊暘性;間接免疫熒光顯示GCNF陰性,oct-4、c-kil均呈暘性反應.由此可知以DMEM+15%胎牛血清+白血病抑製因子(leukemia inhibitory factor,LIF)+L-穀氨酰胺等為培養基,成功建立瞭精原榦細胞的體外培養體繫.
건립일충간단、유효체외분리화배양정원간세포(spermatogonia stem cell,SSCs)적방법.채용매소화6~8d신생소서고환제비고환세포현액후진행배양,감성린산매(AKP)염색화간접면역형광대배양적세포진행감정;결과현시:SSCs배양3~5천가관찰도세포극륭적산생,AKP염색강양성;간접면역형광현시GCNF음성,oct-4、c-kil균정양성반응.유차가지이DMEM+15%태우혈청+백혈병억제인자(leukemia inhibitory factor,LIF)+L-곡안선알등위배양기,성공건립료정원간세포적체외배양체계.