CAJ | 학술논문

背景:目前对脐带间充质干细胞的研究集中在分离纯化及药物作用下诱导分化.分化过程中细胞外基质成分的作用及信号通路的关系的研究报道很少.目的:研究层粘连蛋白在脐带间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的作用与黏着斑激酶表达之间的关系.方法:取对数生长脐带间充质干细胞分为4组:层粘连蛋白诱导组:层粘连蛋白质量浓度分别为50,25,5,1 mg/L;成骨诱导组:用成骨诱导液处理;复合诱导组:用层粘连蛋白和成骨诱导液处理.对照组:未用层粘连蛋白和成骨诱导液处理.连续培养4周.观察细胞形态、茜素红染色分析钙盐沉积,检测碱性磷酸酶活性,组织化学组化与Westen blot检测ERK1/2、P-ERK、黏着斑激酶的表达.结果与结论:①倒置显微镜下对照组比诱导组细胞胞体呈矮柱状、有短突起彼此相连,核圆形.②茜素红染色细胞形成红色,表现为阳性.复合诱导组比其他组要高、不同时间点比21 d钙盐沉积明显增多(P < 0.05).③层粘连蛋白组碱性磷酸酶活性比对照组高、其诱导第7天后作用显著(P < 0.05).层粘连蛋白不同质量浓度组之间碱性磷酸酶活性,差异无显著性意义(P > 0.05).④组织化学组化鉴定ERK、P-ERK、黏着斑激酶表达均与对照比层粘连蛋白组表达增强(P < 0.05).⑤Westen Blot检测成骨诱导组与复合诱导组有ERK、P-ERK、黏着斑激酶蛋白表达,层粘连蛋白组与对照组无表达.结果提示,脐带间充质干细胞向成骨细胞分化过程中层粘连蛋白有促分化作用,层粘连蛋白上调信号转导蛋白黏着斑激酶、ERK、P-ERK表达.
배경:목전대제대간충질간세포적연구집중재분리순화급약물작용하유도분화.분화과정중세포외기질성분적작용급신호통로적관계적연구보도흔소.목적:연구층점련단백재제대간충질간세포향성골세포분화과정중적작용여점착반격매표체지간적관계.방법:취대수생장제대간충질간세포분위4조:층점련단백유도조:층점련단백질량농도분별위50,25,5,1 mg/L;성골유도조:용성골유도액처리;복합유도조:용층점련단백화성골유도액처리.대조조:미용층점련단백화성골유도액처리.련속배양4주.관찰세포형태、천소홍염색분석개염침적,검측감성린산매활성,조직화학조화여Westen blot검측ERK1/2、P-ERK、점착반격매적표체.결과여결론:①도치현미경하대조조비유도조세포포체정왜주상、유단돌기피차상련,핵원형.②천소홍염색세포형성홍색,표현위양성.복합유도조비기타조요고、불동시간점비21 d개염침적명현증다(P < 0.05).③층점련단백조감성린산매활성비대조조고、기유도제7천후작용현저(P < 0.05).층점련단백불동질량농도조지간감성린산매활성,차이무현저성의의(P > 0.05).④조직화학조화감정ERK、P-ERK、점착반격매표체균여대조비층점련단백조표체증강(P < 0.05).⑤Westen Blot검측성골유도조여복합유도조유ERK、P-ERK、점착반격매단백표체,층점련단백조여대조조무표체.결과제시,제대간충질간세포향성골세포분화과정중층점련단백유촉분화작용,층점련단백상조신호전도단백점착반격매、ERK、P-ERK표체.