中原医刊
中原醫刊
중원의간
CENTRAL PLAINS MEDICAL JOURNAL
2007年
10期
37-38
,共2页
岳学静%宋波%许予明%赵国强%韩志强
嶽學靜%宋波%許予明%趙國彊%韓誌彊
악학정%송파%허여명%조국강%한지강
人端粒酶逆转录酶%真核表达载体%重组质粒
人耑粒酶逆轉錄酶%真覈錶達載體%重組質粒
인단립매역전록매%진핵표체재체%중조질립
目的 构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达质粒并转染人骨髓间充质干细胞(hMSC).方法 ①目的 基因的获得:用RT-PCR法从人食管癌组织中扩增出带有EcoR I酶切位点的hTERT基因片段;②将hTERT基因片段插入pcDNA3.1后转化到大肠杆菌DH5α,阳性克隆酶切鉴定后测序分析;③大量提取质粒,非脂质体法转染hMSC,并用G418筛选出阳性克隆.结果与结论 pcDNA3.1/hTERT重组质粒构建成功,并能在hMSC中整合.
目的 構建含人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)基因的真覈錶達質粒併轉染人骨髓間充質榦細胞(hMSC).方法 ①目的 基因的穫得:用RT-PCR法從人食管癌組織中擴增齣帶有EcoR I酶切位點的hTERT基因片段;②將hTERT基因片段插入pcDNA3.1後轉化到大腸桿菌DH5α,暘性剋隆酶切鑒定後測序分析;③大量提取質粒,非脂質體法轉染hMSC,併用G418篩選齣暘性剋隆.結果與結論 pcDNA3.1/hTERT重組質粒構建成功,併能在hMSC中整閤.
목적 구건함인단립매역전록매(hTERT)기인적진핵표체질립병전염인골수간충질간세포(hMSC).방법 ①목적 기인적획득:용RT-PCR법종인식관암조직중확증출대유EcoR I매절위점적hTERT기인편단;②장hTERT기인편단삽입pcDNA3.1후전화도대장간균DH5α,양성극륭매절감정후측서분석;③대량제취질립,비지질체법전염hMSC,병용G418사선출양성극륭.결과여결론 pcDNA3.1/hTERT중조질립구건성공,병능재hMSC중정합.
