单顺反子表达人GM-CSF和B7.1融合基因真核表达载体的构建和鉴定
단순반자표체인GM-CSF화B7.1융합기인진핵표체재체적구건화감정
Construction and Identification of Eukaryotic Vector Expression Containing Human GM-CSF and B7.1 Fusion Gene from A Single Cistron
  • 万方数据
    福建医科大学学报 복건의과대학학보
    JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
    2003年 2期 137-140 ,共4页

    李乃农%陈元仲%杨旭伟%吴勇%黄惠芳%黄美娟%张昭秀%吕联煌

    리내농%진원중%양욱위%오용%황혜방%황미연%장소수%려련황

    粒细胞巨噬细胞集落刺激因子%基因融合%序列分析%点突变%抗原,CD80 粒細胞巨噬細胞集落刺激因子%基因融閤%序列分析%點突變%抗原,CD80
    립세포거서세포집락자격인자%기인융합%서렬분석%점돌변%항원,CD80
    目的构建单顺反子表达人GM-CSF和B7.1融合基因真核表达载体.方法应用巨引物PCR技术对hGM-CSF基因cDNA进行定点突变;应用PCR重叠延伸法,将hGM-CSF和hB7.1基因的cDNA编码序列通过一linker序列拼接,构建hGM-CSF与hB7.1融合基因hGM-B7.1,将其插入pcDNA3真核表达载体,测定核苷酸序列.结果序列分析表明:(1)hGM-CSF突变体基因cDNA编码序列的178位核苷酸由C变为A,其余核苷酸序列均未发生变化;(2)hGM-CSF、linker、hB7.1的连接顺序、方向及序列完全正确.结论构建pcDNA3-hGM-B7.1融合基因真核表达载体成功.
    목적구건단순반자표체인GM-CSF화B7.1융합기인진핵표체재체.방법응용거인물PCR기술대hGM-CSF기인cDNA진행정점돌변;응용PCR중첩연신법,장hGM-CSF화hB7.1기인적cDNA편마서렬통과일linker서렬병접,구건hGM-CSF여hB7.1융합기인hGM-B7.1,장기삽입pcDNA3진핵표체재체,측정핵감산서렬.결과서렬분석표명:(1)hGM-CSF돌변체기인cDNA편마서렬적178위핵감산유C변위A,기여핵감산서렬균미발생변화;(2)hGM-CSF、linker、hB7.1적련접순서、방향급서렬완전정학.결론구건pcDNA3-hGM-B7.1융합기인진핵표체재체성공.
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