生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
4期
493-496
,共4页
耐热性%耐热碱性磷酸酶%三维结构模拟%突变体
耐熱性%耐熱堿性燐痠酶%三維結構模擬%突變體
내열성%내열감성린산매%삼유결구모의%돌변체
从耐热碱性磷酸酶(TAP)200多个随机突变体的克隆库中选出耐热性明显下降的4株突变体,进行全序列及表达产物的最高耐受温度和最适反应温度测定和酶分子高级结构的模拟,分析突变位点、高级结构和耐热性表现三者的关系,探讨引起耐热性变化的机理.结构模拟显示所有突变位点都仅能引起细微的、局部的结构变化,除T320→I外都未直接触及酶的活性中心;结构上的细微改变虽然对最适反应温度影响不明显,但却使最高耐受温度降低了10℃左右;T320→I靠近酶的活性中心,尽管未能引起结构的较大变化,但却使最高耐受温度和最适反应温度同时显著降低.可见,多数点突变对高级结构的影响都不剧烈,但对耐热性尤其是最高耐受温度的影响却比较明显,一般地,在非活性区的突变通常只能引起最高耐受温度的降低,靠近活性区的突变则能同时引起最适反应温度和最高耐受温度的降低.
從耐熱堿性燐痠酶(TAP)200多箇隨機突變體的剋隆庫中選齣耐熱性明顯下降的4株突變體,進行全序列及錶達產物的最高耐受溫度和最適反應溫度測定和酶分子高級結構的模擬,分析突變位點、高級結構和耐熱性錶現三者的關繫,探討引起耐熱性變化的機理.結構模擬顯示所有突變位點都僅能引起細微的、跼部的結構變化,除T320→I外都未直接觸及酶的活性中心;結構上的細微改變雖然對最適反應溫度影響不明顯,但卻使最高耐受溫度降低瞭10℃左右;T320→I靠近酶的活性中心,儘管未能引起結構的較大變化,但卻使最高耐受溫度和最適反應溫度同時顯著降低.可見,多數點突變對高級結構的影響都不劇烈,但對耐熱性尤其是最高耐受溫度的影響卻比較明顯,一般地,在非活性區的突變通常隻能引起最高耐受溫度的降低,靠近活性區的突變則能同時引起最適反應溫度和最高耐受溫度的降低.
종내열감성린산매(TAP)200다개수궤돌변체적극륭고중선출내열성명현하강적4주돌변체,진행전서렬급표체산물적최고내수온도화최괄반응온도측정화매분자고급결구적모의,분석돌변위점、고급결구화내열성표현삼자적관계,탐토인기내열성변화적궤리.결구모의현시소유돌변위점도부능인기세미적、국부적결구변화,제T320→I외도미직접촉급매적활성중심;결구상적세미개변수연대최괄반응온도영향불명현,단각사최고내수온도강저료10℃좌우;T320→I고근매적활성중심,진관미능인기결구적교대변화,단각사최고내수온도화최괄반응온도동시현저강저.가견,다수점돌변대고급결구적영향도불극렬,단대내열성우기시최고내수온도적영향각비교명현,일반지,재비활성구적돌변통상지능인기최고내수온도적강저,고근활성구적돌변칙능동시인기최괄반응온도화최고내수온도적강저.
