西安交通大学学报(医学版)
西安交通大學學報(醫學版)
서안교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2003年
5期
413-415,442
,共4页
刘鹏%李昂%马军%尚宁宽%来宝长%司履生%王一理
劉鵬%李昂%馬軍%尚寧寬%來寶長%司履生%王一理
류붕%리앙%마군%상저관%래보장%사리생%왕일리
人乳头瘤病毒6/11型%DNA疫苗%宫颈癌
人乳頭瘤病毒6/11型%DNA疫苗%宮頸癌
인유두류병독6/11형%DNA역묘%궁경암
目的构建HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7预防、治疗性DNA疫苗质粒.方法运用PCR扩增HPV-6/11 L1、E6、E7序列,PCR产物连接至pGEM T-Easy质粒,测序鉴定正确后,分别连接至真核表达载体pVAX,再用酶切、连接而构建成HPV-6/11 L1-E6/E7-pVAX质粒.运用电穿孔法将所获得质粒转染COS-7细胞,免疫组化检测蛋白表达情况.结果所构建质粒的插入目的片段测序正确;免疫组化检测在胞浆胞核可见棕黄色点状阳性产物沉积.结论所构建的HPV-6/11 L1-E6/E7-pVAX融合蛋白表达质粒可在体外表达L1-E6/L1-E7蛋白,为今后进行DNA疫苗的动物实验及临床实验研究做好准备.
目的構建HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7預防、治療性DNA疫苗質粒.方法運用PCR擴增HPV-6/11 L1、E6、E7序列,PCR產物連接至pGEM T-Easy質粒,測序鑒定正確後,分彆連接至真覈錶達載體pVAX,再用酶切、連接而構建成HPV-6/11 L1-E6/E7-pVAX質粒.運用電穿孔法將所穫得質粒轉染COS-7細胞,免疫組化檢測蛋白錶達情況.結果所構建質粒的插入目的片段測序正確;免疫組化檢測在胞漿胞覈可見棕黃色點狀暘性產物沉積.結論所構建的HPV-6/11 L1-E6/E7-pVAX融閤蛋白錶達質粒可在體外錶達L1-E6/L1-E7蛋白,為今後進行DNA疫苗的動物實驗及臨床實驗研究做好準備.
목적구건HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7예방、치료성DNA역묘질립.방법운용PCR확증HPV-6/11 L1、E6、E7서렬,PCR산물련접지pGEM T-Easy질립,측서감정정학후,분별련접지진핵표체재체pVAX,재용매절、련접이구건성HPV-6/11 L1-E6/E7-pVAX질립.운용전천공법장소획득질립전염COS-7세포,면역조화검측단백표체정황.결과소구건질립적삽입목적편단측서정학;면역조화검측재포장포핵가견종황색점상양성산물침적.결론소구건적HPV-6/11 L1-E6/E7-pVAX융합단백표체질립가재체외표체L1-E6/L1-E7단백,위금후진행DNA역묘적동물실험급림상실험연구주호준비.
