CAJ | 학술논문

目的:探索小鼠IL-18基因治疗肿瘤的方法和疗效.方法:构建pSecTag2B-mIL-18真核分泌表达载体,并用其转染HT-29细胞,RT-PCR和ELISA检测 IL-18 表达情况;将转染pSecTag2B-mIL-18质粒的HT-29培养上清,加入到小鼠T淋巴细胞培养液,ELISA、RT-PCR检测T淋巴细胞分泌IFN-γ;脂质体包被的pSecTag2B-mIL-18裸质粒,采用肌肉注射法转入Balb/c小鼠,检测IL-18蛋白表达情况;在Balb/c小鼠接种小鼠colon-26肿瘤细胞的同时, 将表达载体pSecTag2B-mIL-18转入,观察抑制肿瘤生长的情况.结果:1) 经酶切和测序鉴定, pSecTag2B-mIL-18真核分泌表达载体所表达的基因序列经比对完全正确.2) pSecTag2B-mIL-18转染 HT-29细胞后,IL-18在 mRNA和蛋白水平高表达.3)转染后的HT-29培养上清可刺激小鼠T淋巴细胞高水平分泌IFN-γ.4)用裸质粒肌肉注射法将pSecTag2B-mIL-18 转入Balb/c小鼠, 证明质粒均能够在小鼠肌肉中表达,且表达的蛋白均能分泌到外周血液循环中.5)接种colon26细胞的Balb/c小鼠,将pSecTag2B-mIL-18转入小鼠, 结果表明IL-18 单独应用能明显抑制肿瘤的生长.结论:pSecTag2B-mIL-18裸质粒肌肉注射具有显著的抗肿瘤作用.
목적:탐색소서IL-18기인치료종류적방법화료효.방법:구건pSecTag2B-mIL-18진핵분비표체재체,병용기전염HT-29세포,RT-PCR화ELISA검측 IL-18 표체정황;장전염pSecTag2B-mIL-18질립적HT-29배양상청,가입도소서T림파세포배양액,ELISA、RT-PCR검측T림파세포분비IFN-γ;지질체포피적pSecTag2B-mIL-18라질립,채용기육주사법전입Balb/c소서,검측IL-18단백표체정황;재Balb/c소서접충소서colon-26종류세포적동시, 장표체재체pSecTag2B-mIL-18전입,관찰억제종류생장적정황.결과:1) 경매절화측서감정, pSecTag2B-mIL-18진핵분비표체재체소표체적기인서렬경비대완전정학.2) pSecTag2B-mIL-18전염 HT-29세포후,IL-18재 mRNA화단백수평고표체.3)전염후적HT-29배양상청가자격소서T림파세포고수평분비IFN-γ.4)용라질립기육주사법장pSecTag2B-mIL-18 전입Balb/c소서, 증명질립균능구재소서기육중표체,차표체적단백균능분비도외주혈액순배중.5)접충colon26세포적Balb/c소서,장pSecTag2B-mIL-18전입소서, 결과표명IL-18 단독응용능명현억제종류적생장.결론:pSecTag2B-mIL-18라질립기육주사구유현저적항종류작용.