药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
85-89
,共5页
宋永波%盛钰%王轶%来琳琳%张景海
宋永波%盛鈺%王軼%來琳琳%張景海
송영파%성옥%왕질%래림림%장경해
东亚钳蝎%抗神经兴奋肽ANEPⅡ%植物表达载体%烟草遗传转化
東亞鉗蝎%抗神經興奮肽ANEPⅡ%植物錶達載體%煙草遺傳轉化
동아겸갈%항신경흥강태ANEPⅡ%식물표체재체%연초유전전화
研究将东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch)抗神经兴奋肽Ⅱ(ANEPⅡ)基因序列定向克隆到植物表达载体pBI121中,构建了植物表达载体pBI-ANEPⅡ.采用三亲交配法和液氮冻融法将重组质粒pBI-ANEPⅡ导入农杆菌中,获得了工程菌pBI-ANEPⅡ/LBA4404.通过农杆菌介导的叶圆盘法转化烟草叶片外植体,在含卡那霉素的培养基上进行转化体的筛选,获得了转基因烟草.通过PCR检测、RT-PCR和Western blotting鉴定,检测结果表明ANEPⅡ蛋白在转基因烟草植株中得到表达.
研究將東亞鉗蝎(Buthus martensii Karsch)抗神經興奮肽Ⅱ(ANEPⅡ)基因序列定嚮剋隆到植物錶達載體pBI121中,構建瞭植物錶達載體pBI-ANEPⅡ.採用三親交配法和液氮凍融法將重組質粒pBI-ANEPⅡ導入農桿菌中,穫得瞭工程菌pBI-ANEPⅡ/LBA4404.通過農桿菌介導的葉圓盤法轉化煙草葉片外植體,在含卡那黴素的培養基上進行轉化體的篩選,穫得瞭轉基因煙草.通過PCR檢測、RT-PCR和Western blotting鑒定,檢測結果錶明ANEPⅡ蛋白在轉基因煙草植株中得到錶達.
연구장동아겸갈(Buthus martensii Karsch)항신경흥강태Ⅱ(ANEPⅡ)기인서렬정향극륭도식물표체재체pBI121중,구건료식물표체재체pBI-ANEPⅡ.채용삼친교배법화액담동융법장중조질립pBI-ANEPⅡ도입농간균중,획득료공정균pBI-ANEPⅡ/LBA4404.통과농간균개도적협원반법전화연초협편외식체,재함잡나매소적배양기상진행전화체적사선,획득료전기인연초.통과PCR검측、RT-PCR화Western blotting감정,검측결과표명ANEPⅡ단백재전기인연초식주중득도표체.
