郑州大学学报(医学版)
鄭州大學學報(醫學版)
정주대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
3期
458-460
,共3页
孙改河%沈燕%张愔%王喜英%金雨琦%苏天水
孫改河%瀋燕%張愔%王喜英%金雨琦%囌天水
손개하%침연%장음%왕희영%금우기%소천수
单核细胞趋化蛋白-1%趋化因子%趋化活性%干预作用
單覈細胞趨化蛋白-1%趨化因子%趨化活性%榦預作用
단핵세포추화단백-1%추화인자%추화활성%간예작용
目的:构建表达N端2-8位氨基酸缺失的突变型单核细胞趋化蛋白-1(mMCP-1),并观察其对单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的干预作用.方法:Megaprimer-PCR构建mMCP-1-pVAX1(pVMm).以脂质体将pVMm转染真核细胞系C2C12,ELISA分析mMCP-1的表达情况.采用趋化实验分析mMCP-1对病毒性心肌炎小鼠外周血单个核细胞(PMNCs)的趋化活性及其对MCP-1的干预作用.结果:①酶切和测序显示野生型MCP-1真核表达载体(pVM)和pVMm构建成功.pVMm在真核细胞C2C12中有效表达.②mMCP-1不具有趋化病毒性心肌炎小鼠PMNCs的活性.与单纯使用MCP-1相比,以不同浓度的mMCP-1和MCP-1同时行趋化实验,被趋化的细胞明显减少(P<0.01),25 μg/L mMCP-1可阻断10 μg/L MCP-1对病毒性心肌炎小鼠PMNC的趋化活性.结论:小鼠MCP-1 N端2-8位氨基酸决定其趋化活性.mMCP-1可用于干预MCP-1的作用.
目的:構建錶達N耑2-8位氨基痠缺失的突變型單覈細胞趨化蛋白-1(mMCP-1),併觀察其對單覈細胞趨化蛋白-1(MCP-1)的榦預作用.方法:Megaprimer-PCR構建mMCP-1-pVAX1(pVMm).以脂質體將pVMm轉染真覈細胞繫C2C12,ELISA分析mMCP-1的錶達情況.採用趨化實驗分析mMCP-1對病毒性心肌炎小鼠外週血單箇覈細胞(PMNCs)的趨化活性及其對MCP-1的榦預作用.結果:①酶切和測序顯示野生型MCP-1真覈錶達載體(pVM)和pVMm構建成功.pVMm在真覈細胞C2C12中有效錶達.②mMCP-1不具有趨化病毒性心肌炎小鼠PMNCs的活性.與單純使用MCP-1相比,以不同濃度的mMCP-1和MCP-1同時行趨化實驗,被趨化的細胞明顯減少(P<0.01),25 μg/L mMCP-1可阻斷10 μg/L MCP-1對病毒性心肌炎小鼠PMNC的趨化活性.結論:小鼠MCP-1 N耑2-8位氨基痠決定其趨化活性.mMCP-1可用于榦預MCP-1的作用.
목적:구건표체N단2-8위안기산결실적돌변형단핵세포추화단백-1(mMCP-1),병관찰기대단핵세포추화단백-1(MCP-1)적간예작용.방법:Megaprimer-PCR구건mMCP-1-pVAX1(pVMm).이지질체장pVMm전염진핵세포계C2C12,ELISA분석mMCP-1적표체정황.채용추화실험분석mMCP-1대병독성심기염소서외주혈단개핵세포(PMNCs)적추화활성급기대MCP-1적간예작용.결과:①매절화측서현시야생형MCP-1진핵표체재체(pVM)화pVMm구건성공.pVMm재진핵세포C2C12중유효표체.②mMCP-1불구유추화병독성심기염소서PMNCs적활성.여단순사용MCP-1상비,이불동농도적mMCP-1화MCP-1동시행추화실험,피추화적세포명현감소(P<0.01),25 μg/L mMCP-1가조단10 μg/L MCP-1대병독성심기염소서PMNC적추화활성.결론:소서MCP-1 N단2-8위안기산결정기추화활성.mMCP-1가용우간예MCP-1적작용.