中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
266-269
,共4页
唐金宝%杨洪鸣%张义军%李万忠
唐金寶%楊洪鳴%張義軍%李萬忠
당금보%양홍명%장의군%리만충
甘氨酸%辛苯昔醇%重组融合蛋白质类%葡萄球菌蛋白质A%绿色荧光蛋白质类%大肠杆菌
甘氨痠%辛苯昔醇%重組融閤蛋白質類%葡萄毬菌蛋白質A%綠色熒光蛋白質類%大腸桿菌
감안산%신분석순%중조융합단백질류%포도구균단백질A%록색형광단백질류%대장간균
目的 考察不同浓度的甘氨酸和Triton X-100对葡萄球菌蛋白质A ZZ亲和肽-增强型绿色荧光蛋白(ZZ-EGFP)融合蛋白在大肠杆菌分泌表达的影响.方法 研究设计为两因素三水平析因设计.向液体培养基中分别加入终浓度0、1%、2%的甘氨酸和0、1%、2%的Triton X-100(共9种组合方式,终浓度均为0者为对照组),诱导大肠杆菌周质腔内ZZ-EGFP融合蛋白泄漏到液体培养基中,以培养上清液荧光强度为观察指标,通过ZZ-EGFP融合蛋白浓度-荧光强度标准曲线快速检测培养基中ZZ-EGFP融合蛋白表达量.结果 培养基中分别加入1%、2%甘氨酸或1%、2%TritonX-100培养后,培养上清液荧光强度分别为 283±11、711±19和622±25、733±25,与对照组(74±5)比较,组间差异均有统计学意义(甘氨酸:F=10.881,P=0.024;Triton X-10:F=12.848,P=0.018);而且甘氨酸与TritonX-100两者之间有交互效应(F=5.441,P=0.005),其中培养基中同时含有终浓度2%甘氨酸及1%Triton X-100时培养上清液荧光强度最高(1854±45),ZZ-EGFP融合蛋白分泌表达量达到10.4 mg/L,与对照组(0.94 mg/L)相比提高了11倍.结论 甘氨酸和Triton X-100能提高ZZ-EGFP融合蛋白在液体培养基中的分泌表达量.
目的 攷察不同濃度的甘氨痠和Triton X-100對葡萄毬菌蛋白質A ZZ親和肽-增彊型綠色熒光蛋白(ZZ-EGFP)融閤蛋白在大腸桿菌分泌錶達的影響.方法 研究設計為兩因素三水平析因設計.嚮液體培養基中分彆加入終濃度0、1%、2%的甘氨痠和0、1%、2%的Triton X-100(共9種組閤方式,終濃度均為0者為對照組),誘導大腸桿菌週質腔內ZZ-EGFP融閤蛋白洩漏到液體培養基中,以培養上清液熒光彊度為觀察指標,通過ZZ-EGFP融閤蛋白濃度-熒光彊度標準麯線快速檢測培養基中ZZ-EGFP融閤蛋白錶達量.結果 培養基中分彆加入1%、2%甘氨痠或1%、2%TritonX-100培養後,培養上清液熒光彊度分彆為 283±11、711±19和622±25、733±25,與對照組(74±5)比較,組間差異均有統計學意義(甘氨痠:F=10.881,P=0.024;Triton X-10:F=12.848,P=0.018);而且甘氨痠與TritonX-100兩者之間有交互效應(F=5.441,P=0.005),其中培養基中同時含有終濃度2%甘氨痠及1%Triton X-100時培養上清液熒光彊度最高(1854±45),ZZ-EGFP融閤蛋白分泌錶達量達到10.4 mg/L,與對照組(0.94 mg/L)相比提高瞭11倍.結論 甘氨痠和Triton X-100能提高ZZ-EGFP融閤蛋白在液體培養基中的分泌錶達量.
목적 고찰불동농도적감안산화Triton X-100대포도구균단백질A ZZ친화태-증강형록색형광단백(ZZ-EGFP)융합단백재대장간균분비표체적영향.방법 연구설계위량인소삼수평석인설계.향액체배양기중분별가입종농도0、1%、2%적감안산화0、1%、2%적Triton X-100(공9충조합방식,종농도균위0자위대조조),유도대장간균주질강내ZZ-EGFP융합단백설루도액체배양기중,이배양상청액형광강도위관찰지표,통과ZZ-EGFP융합단백농도-형광강도표준곡선쾌속검측배양기중ZZ-EGFP융합단백표체량.결과 배양기중분별가입1%、2%감안산혹1%、2%TritonX-100배양후,배양상청액형광강도분별위 283±11、711±19화622±25、733±25,여대조조(74±5)비교,조간차이균유통계학의의(감안산:F=10.881,P=0.024;Triton X-10:F=12.848,P=0.018);이차감안산여TritonX-100량자지간유교호효응(F=5.441,P=0.005),기중배양기중동시함유종농도2%감안산급1%Triton X-100시배양상청액형광강도최고(1854±45),ZZ-EGFP융합단백분비표체량체도10.4 mg/L,여대조조(0.94 mg/L)상비제고료11배.결론 감안산화Triton X-100능제고ZZ-EGFP융합단백재액체배양기중적분비표체량.
