CAJ | 학술논문

目的:建立基于假病毒技术的抗H5N1禽流感病毒中药筛选方法,利用血清药理学的方法系统评价攻下方、解毒方、凉血方和扶正方4类中药复方体外对H5N1禽流感病毒活性的影响及其机制.方法:构建整合H5N1禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白的假病毒,雄性Wistar大鼠25只灌胃不同中药制备复方中药血清.采用犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞和人胚肾细胞293T为研究对象,将不同浓度药物血清分别与假病毒或靶细胞体外培养后,观察药物血清对假病毒活性的直接抑制作用,通过流式细胞术检测药物血清对H5N1禽流感病毒HA蛋白表达的影响.结果:HA蛋白特异性中和抗体284在50 μL(抗体总量500 μg)、25 μL(抗体总量250 μg)及12.5 μL(抗体总量125 μg)的剂量条件下均可以有效抑制假病毒的感染活性,从而证实利用假病毒技术筛选药物的方法的可行性.与对照血清相比,4种复方中药含药血清体外对假病毒均无明显抑制作用(P＞0.05),也不能有效预防假病毒感染(P＞0.05),不能抑制H5N1流感病毒HA蛋白的表达.结论:假病毒技术是一种安全、高效、精确的筛选抗H5N1禽流感病毒中药的方法;4类复方中药含药血清并不含有作用于H5N1假病毒HA蛋白及唾液酸α-2,3半乳糖苷受体的有效成分或单体.
목적:건립기우가병독기술적항H5N1금류감병독중약사선방법,이용혈청약이학적방법계통평개공하방、해독방、량혈방화부정방4류중약복방체외대H5N1금류감병독활성적영향급기궤제.방법:구건정합H5N1금류감병독혈응소(hemagglutinin,HA)단백적가병독,웅성Wistar대서25지관위불동중약제비복방중약혈청.채용견신(Madin-Darby canine kidney,MDCK)세포화인배신세포293T위연구대상,장불동농도약물혈청분별여가병독혹파세포체외배양후,관찰약물혈청대가병독활성적직접억제작용,통과류식세포술검측약물혈청대H5N1금류감병독HA단백표체적영향.결과:HA단백특이성중화항체284재50 μL(항체총량500 μg)、25 μL(항체총량250 μg)급12.5 μL(항체총량125 μg)적제량조건하균가이유효억제가병독적감염활성,종이증실이용가병독기술사선약물적방법적가행성.여대조혈청상비,4충복방중약함약혈청체외대가병독균무명현억제작용(P＞0.05),야불능유효예방가병독감염(P＞0.05),불능억제H5N1류감병독HA단백적표체.결론:가병독기술시일충안전、고효、정학적사선항H5N1금류감병독중약적방법;4류복방중약함약혈청병불함유작용우H5N1가병독HA단백급타액산α-2,3반유당감수체적유효성분혹단체.