中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
7期
222-226
,共5页
冯頔%张莉弘%魏毅%刘金亮%潘洪玉%张世宏
馮頔%張莉弘%魏毅%劉金亮%潘洪玉%張世宏
풍적%장리홍%위의%류금량%반홍옥%장세굉
苏云金芽孢杆菌%cry1%植物表达载体%农杆菌介导法%大豆
囌雲金芽孢桿菌%cry1%植物錶達載體%農桿菌介導法%大豆
소운금아포간균%cry1%식물표체재체%농간균개도법%대두
此研究利用醋酸钠-抗生素加热法从土壤中分离获得1株产晶体的苏云金芽孢杆菌菌株(Bacillus thuringiensis).通过已知cry1基因设计引物,以分离得到的菌株DNA为模板进行PCR扩增,将克隆到的目的片段进行测序.测序结果表明:该序列与cry1基因同源性达到90%~99%.将该基因连接到植物双元表达载体pBI121中,构建了该基因的植物表达载体,并将阳性重组质粒转化根癌农杆菌EHA105,利用农杆菌侵染子叶节的方法进行大豆的转化.通过初步的PCR验证,成功获得了转基因植株,建立了大豆的转化体系.
此研究利用醋痠鈉-抗生素加熱法從土壤中分離穫得1株產晶體的囌雲金芽孢桿菌菌株(Bacillus thuringiensis).通過已知cry1基因設計引物,以分離得到的菌株DNA為模闆進行PCR擴增,將剋隆到的目的片段進行測序.測序結果錶明:該序列與cry1基因同源性達到90%~99%.將該基因連接到植物雙元錶達載體pBI121中,構建瞭該基因的植物錶達載體,併將暘性重組質粒轉化根癌農桿菌EHA105,利用農桿菌侵染子葉節的方法進行大豆的轉化.通過初步的PCR驗證,成功穫得瞭轉基因植株,建立瞭大豆的轉化體繫.
차연구이용작산납-항생소가열법종토양중분리획득1주산정체적소운금아포간균균주(Bacillus thuringiensis).통과이지cry1기인설계인물,이분리득도적균주DNA위모판진행PCR확증,장극륭도적목적편단진행측서.측서결과표명:해서렬여cry1기인동원성체도90%~99%.장해기인련접도식물쌍원표체재체pBI121중,구건료해기인적식물표체재체,병장양성중조질립전화근암농간균EHA105,이용농간균침염자협절적방법진행대두적전화.통과초보적PCR험증,성공획득료전기인식주,건립료대두적전화체계.