科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2011年
21期
4977-4981,4985
,共6页
王芊艺%柏兆方%梁冰%王玉博%周涛
王芊藝%柏兆方%樑冰%王玉博%週濤
왕천예%백조방%량빙%왕옥박%주도
Tet-on系统%CUEDC2%转基因小鼠
Tet-on繫統%CUEDC2%轉基因小鼠
Tet-on계통%CUEDC2%전기인소서
建立Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠模型,构建转基因表达载体,经细胞诱导表达验证后,酶切得到含有CUEDC2的线性DNA片段,并采用显微注射的方法及后续筛选鉴定,得到CUEDC2转基因小鼠.进而通过与乳腺特异表达的MMTV-rtTA转基因小鼠交配,得到CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠.利用2 mg/mL的多西环素(Doxycycline)诱导小鼠体内CUEDC2表达.通过Western Blot、免疫组化检测表达.结果表明经诱导CUEDC2/rtTA双阳性转墓因小鼠的2个Founder的F1、F2代在转录水平和蛋白水平均成功表达CUEDC2,并具有乳腺特异性.表明Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠制备成功.为后续CUEDC2的功能研究奠定了技术基础.
建立Tet-on繫統誘導乳腺特異錶達CUEDC2的轉基因小鼠模型,構建轉基因錶達載體,經細胞誘導錶達驗證後,酶切得到含有CUEDC2的線性DNA片段,併採用顯微註射的方法及後續篩選鑒定,得到CUEDC2轉基因小鼠.進而通過與乳腺特異錶達的MMTV-rtTA轉基因小鼠交配,得到CUEDC2/rtTA雙暘性轉基因小鼠.利用2 mg/mL的多西環素(Doxycycline)誘導小鼠體內CUEDC2錶達.通過Western Blot、免疫組化檢測錶達.結果錶明經誘導CUEDC2/rtTA雙暘性轉墓因小鼠的2箇Founder的F1、F2代在轉錄水平和蛋白水平均成功錶達CUEDC2,併具有乳腺特異性.錶明Tet-on繫統誘導乳腺特異錶達CUEDC2的轉基因小鼠製備成功.為後續CUEDC2的功能研究奠定瞭技術基礎.
건립Tet-on계통유도유선특이표체CUEDC2적전기인소서모형,구건전기인표체재체,경세포유도표체험증후,매절득도함유CUEDC2적선성DNA편단,병채용현미주사적방법급후속사선감정,득도CUEDC2전기인소서.진이통과여유선특이표체적MMTV-rtTA전기인소서교배,득도CUEDC2/rtTA쌍양성전기인소서.이용2 mg/mL적다서배소(Doxycycline)유도소서체내CUEDC2표체.통과Western Blot、면역조화검측표체.결과표명경유도CUEDC2/rtTA쌍양성전묘인소서적2개Founder적F1、F2대재전록수평화단백수평균성공표체CUEDC2,병구유유선특이성.표명Tet-on계통유도유선특이표체CUEDC2적전기인소서제비성공.위후속CUEDC2적공능연구전정료기술기출.
