现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2011年
9期
1716-1720
,共5页
陈永春%庄英帜%梁晓秋%王燕%郭彩霞
陳永春%莊英幟%樑曉鞦%王燕%郭綵霞
진영춘%장영치%량효추%왕연%곽채하
PIG11%caspase-8%Bcl-2%凋亡%HepG2细胞
PIG11%caspase-8%Bcl-2%凋亡%HepG2細胞
PIG11%caspase-8%Bcl-2%조망%HepG2세포
目的:利用本实验室已建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株和PIG11蛋白稳定高表达HepG2细胞株,研究Caspase-8和Bcl-2在PIG11诱导HepG2细胞凋亡中的作用,进一步探讨PIG11基因表达对HepG2细胞凋亡的机制.方法:细胞培养,分组:HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2(pLXSN-PIG11转染建立PIG11蛋白高表达HepG2细胞)、pLXSN-HepG2(pLXSN空载体转染HepG2细胞)、miR-PIG11-HepG2(miRNA干扰PIG11蛋白低表达HepG2细胞)、miR- HepG2(干扰空载体HepG2细胞).Hoechst 33342染色荧光和PI染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况.Western blot检测Caspase-8蛋白、Bcl-2蛋白的表达情况.结果:Hoechst 33342染色荧光显微镜下pLXSN-PIG11-HepG2细胞组可见核染色质浓缩,核碎片,荧光增强,以及凋亡小体.PI染色流式细胞仪检测结果显示:HepG2细胞、miR-PIG11-HepG2细胞、miR -HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2细胞、pLXSN-HepG2细胞的凋亡率分别为5.72%±0.81%、1.34%±0.71%、5.10%±0.40%、34.83%±2.29%、5.34%±0.60%.PIG11高表达的pLXSN-PIG11-HepG2细胞组凋亡率比其它各组增高(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞组凋亡率降低(P<0.01).Western blot检测结果显示PIG11高表达的pLXSN-PIG11-HepG2细胞Caspase-8蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01),PIG11低表达的miR -PIG11- HepG2细胞Caspase-8蛋白的表达下调,Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01).结论:PIG11蛋白高表达能诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与Caspase-8蛋白及Bcl-2蛋白表达相关.
目的:利用本實驗室已建立PIG11蛋白穩定低錶達的HepG2細胞株和PIG11蛋白穩定高錶達HepG2細胞株,研究Caspase-8和Bcl-2在PIG11誘導HepG2細胞凋亡中的作用,進一步探討PIG11基因錶達對HepG2細胞凋亡的機製.方法:細胞培養,分組:HepG2細胞、pLXSN-PIG11-HepG2(pLXSN-PIG11轉染建立PIG11蛋白高錶達HepG2細胞)、pLXSN-HepG2(pLXSN空載體轉染HepG2細胞)、miR-PIG11-HepG2(miRNA榦擾PIG11蛋白低錶達HepG2細胞)、miR- HepG2(榦擾空載體HepG2細胞).Hoechst 33342染色熒光和PI染色流式細胞儀檢測各組細胞凋亡情況.Western blot檢測Caspase-8蛋白、Bcl-2蛋白的錶達情況.結果:Hoechst 33342染色熒光顯微鏡下pLXSN-PIG11-HepG2細胞組可見覈染色質濃縮,覈碎片,熒光增彊,以及凋亡小體.PI染色流式細胞儀檢測結果顯示:HepG2細胞、miR-PIG11-HepG2細胞、miR -HepG2細胞、pLXSN-PIG11-HepG2細胞、pLXSN-HepG2細胞的凋亡率分彆為5.72%±0.81%、1.34%±0.71%、5.10%±0.40%、34.83%±2.29%、5.34%±0.60%.PIG11高錶達的pLXSN-PIG11-HepG2細胞組凋亡率比其它各組增高(P<0.01),PIG11低錶達的miR-PIG11-HepG2細胞組凋亡率降低(P<0.01).Western blot檢測結果顯示PIG11高錶達的pLXSN-PIG11-HepG2細胞Caspase-8蛋白錶達上調,Bcl-2蛋白錶達下調(P<0.01),PIG11低錶達的miR -PIG11- HepG2細胞Caspase-8蛋白的錶達下調,Bcl-2蛋白錶達上調(P<0.01).結論:PIG11蛋白高錶達能誘導HepG2細胞凋亡,其機製可能與Caspase-8蛋白及Bcl-2蛋白錶達相關.
목적:이용본실험실이건립PIG11단백은정저표체적HepG2세포주화PIG11단백은정고표체HepG2세포주,연구Caspase-8화Bcl-2재PIG11유도HepG2세포조망중적작용,진일보탐토PIG11기인표체대HepG2세포조망적궤제.방법:세포배양,분조:HepG2세포、pLXSN-PIG11-HepG2(pLXSN-PIG11전염건립PIG11단백고표체HepG2세포)、pLXSN-HepG2(pLXSN공재체전염HepG2세포)、miR-PIG11-HepG2(miRNA간우PIG11단백저표체HepG2세포)、miR- HepG2(간우공재체HepG2세포).Hoechst 33342염색형광화PI염색류식세포의검측각조세포조망정황.Western blot검측Caspase-8단백、Bcl-2단백적표체정황.결과:Hoechst 33342염색형광현미경하pLXSN-PIG11-HepG2세포조가견핵염색질농축,핵쇄편,형광증강,이급조망소체.PI염색류식세포의검측결과현시:HepG2세포、miR-PIG11-HepG2세포、miR -HepG2세포、pLXSN-PIG11-HepG2세포、pLXSN-HepG2세포적조망솔분별위5.72%±0.81%、1.34%±0.71%、5.10%±0.40%、34.83%±2.29%、5.34%±0.60%.PIG11고표체적pLXSN-PIG11-HepG2세포조조망솔비기타각조증고(P<0.01),PIG11저표체적miR-PIG11-HepG2세포조조망솔강저(P<0.01).Western blot검측결과현시PIG11고표체적pLXSN-PIG11-HepG2세포Caspase-8단백표체상조,Bcl-2단백표체하조(P<0.01),PIG11저표체적miR -PIG11- HepG2세포Caspase-8단백적표체하조,Bcl-2단백표체상조(P<0.01).결론:PIG11단백고표체능유도HepG2세포조망,기궤제가능여Caspase-8단백급Bcl-2단백표체상관.
