CAJ | 학술논문

应用多种化学修饰剂对假单孢菌G6-2产生的碱性木聚糖酶A(XynA)进行了修饰.结果表明,作用于色氨酸和谷氨酸(和/或天冬氨酸)的试剂NBS(N-Bromosuccinimide)和WRK(N-Ethyl-5-phenylisoxazolium-3-sulfonate)可分别使酶活明显降低,而作用与丝氨酸、精氨酸、酪氨酸的试剂对酶活无明显影响.XynA的化学修饰动力学分析表明,每个酶分子中有1个色氨酸残基和1个谷氨酸(或天冬氨酸)残基对酶的活性特别重要.NBS的滴定结果表明,木聚糖的加入可使1个色氨酸残基被保护,木聚糖对NBS的荧光猝灭有22%的保护作用.0.2%的燕麦木聚糖可完全阻止NBS对XynA的修饰作用;而即使2%的木聚糖也不能阻止WRK的灭活作用.NBS可使XynA的Km增大4倍,而WRK可使其Vmax降低三分之二.这些结果表明,色氨酸和谷氨酸(或天冬氨酸)残基位于XynA的活性部位,且前者位于XynA的底物结合中心,后者位于酶的催化中心.图6表1参14
응용다충화학수식제대가단포균G6-2산생적감성목취당매A(XynA)진행료수식.결과표명,작용우색안산화곡안산(화/혹천동안산)적시제NBS(N-Bromosuccinimide)화WRK(N-Ethyl-5-phenylisoxazolium-3-sulfonate)가분별사매활명현강저,이작용여사안산、정안산、락안산적시제대매활무명현영향.XynA적화학수식동역학분석표명,매개매분자중유1개색안산잔기화1개곡안산(혹천동안산)잔기대매적활성특별중요.NBS적적정결과표명,목취당적가입가사1개색안산잔기피보호,목취당대NBS적형광졸멸유22%적보호작용.0.2%적연맥목취당가완전조지NBS대XynA적수식작용;이즉사2%적목취당야불능조지WRK적멸활작용.NBS가사XynA적Km증대4배,이WRK가사기Vmax강저삼분지이.저사결과표명,색안산화곡안산(혹천동안산)잔기위우XynA적활성부위,차전자위우XynA적저물결합중심,후자위우매적최화중심.도6표1삼14