CAJ | 학술논문

目的:观察抗肝癌重组单链免疫毒素hdsFv-RC-RNase对荷人肝癌裸鼠移植瘤的导向治疗作用,并探讨其临床应用价值.方法:将原核表达载体TIG-hdsFv-RC-RNase转化E.coli BL21(DE3)plys中,利用IPTG大量诱导表达抗肝癌hdsFv-RC-RNase重组单链免疫毒素.表达产物在非变性条件下经Ni-NTA Agarose亲合层析法纯化并体外复性,利用细胞ELISA法检测其特异性结合体外培养的人肝癌细胞的免疫活性.建立荷人肝癌裸鼠移植瘤动物模型,初步评估其对荷人肝癌裸鼠移植瘤的导向治疗作用.结果:工程菌经IPTG诱导后,出现一条相对分子质量约为41 000的新生蛋白带,且主要以可溶性形式表达.纯化后表达产物的纯度达到基本均一.细胞ELISA检测结果显示,纯化产物复性后能够与体外培养的人肝癌细胞特异性结合,而对正常肝细胞的结合能力非常弱,两者具有非常显著的差异﹙P＜0.01).导向治疗结果表明,其对荷人肝癌裸鼠移植瘤治疗有效率为100%,与生理盐水组相比具有非常显著的差异(P＜0.01),抑瘤率达到79.38%.结论:成功获得了特异性强的有活性的抗肝癌重组单链免疫毒素hdsFv-RC-RNase,其对荷人肝癌裸鼠移植瘤具有一定的导向治疗作用,可能成为抗肝癌导向治疗药物.
목적:관찰항간암중조단련면역독소hdsFv-RC-RNase대하인간암라서이식류적도향치료작용,병탐토기림상응용개치.방법:장원핵표체재체TIG-hdsFv-RC-RNase전화E.coli BL21(DE3)plys중,이용IPTG대량유도표체항간암hdsFv-RC-RNase중조단련면역독소.표체산물재비변성조건하경Ni-NTA Agarose친합층석법순화병체외복성,이용세포ELISA법검측기특이성결합체외배양적인간암세포적면역활성.건립하인간암라서이식류동물모형,초보평고기대하인간암라서이식류적도향치료작용.결과:공정균경IPTG유도후,출현일조상대분자질량약위41 000적신생단백대,차주요이가용성형식표체.순화후표체산물적순도체도기본균일.세포ELISA검측결과현시,순화산물복성후능구여체외배양적인간암세포특이성결합,이대정상간세포적결합능력비상약,량자구유비상현저적차이﹙P＜0.01).도향치료결과표명,기대하인간암라서이식류치료유효솔위100%,여생리염수조상비구유비상현저적차이(P＜0.01),억류솔체도79.38%.결론:성공획득료특이성강적유활성적항간암중조단련면역독소hdsFv-RC-RNase,기대하인간암라서이식류구유일정적도향치료작용,가능성위항간암도향치료약물.