生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
2期
189-192
,共4页
郭宁%宗利丽%严景华%丁丽华%朱建华%叶棋浓
郭寧%宗利麗%嚴景華%丁麗華%硃建華%葉棋濃
곽저%종리려%엄경화%정려화%주건화%협기농
Smads%转录激活%荧光素酶活性
Smads%轉錄激活%熒光素酶活性
Smads%전록격활%형광소매활성
目的:构建Smads转录激活检测系统,以研究Smad2、Smad3、Smad4的功能.方法:将Smad2/3/4编码序列以正确读码框与pRC-1ac载体中的Lac阻遏蛋白编码序列融合构建重组质粒,将重组质粒与受Lac操纵子调控的荧光素酶报告基因质粒共转染293T细胞,检测荧光素酶活性,其活性的强弱即代表转录活性的强弱.结果:Smad2和Smad3具有较强的依赖于TGF-β1的转录活性;Smad4全长没有检测到转录活性,但其SAD结构域有不依赖于TGF-β1的转录活性,MH2结构域有依赖于TGF-β1的转录活性.结论:构建的Smads转录激活检测系统能有效地用于Smad2、Smad3、Smad4功能的研究.
目的:構建Smads轉錄激活檢測繫統,以研究Smad2、Smad3、Smad4的功能.方法:將Smad2/3/4編碼序列以正確讀碼框與pRC-1ac載體中的Lac阻遏蛋白編碼序列融閤構建重組質粒,將重組質粒與受Lac操縱子調控的熒光素酶報告基因質粒共轉染293T細胞,檢測熒光素酶活性,其活性的彊弱即代錶轉錄活性的彊弱.結果:Smad2和Smad3具有較彊的依賴于TGF-β1的轉錄活性;Smad4全長沒有檢測到轉錄活性,但其SAD結構域有不依賴于TGF-β1的轉錄活性,MH2結構域有依賴于TGF-β1的轉錄活性.結論:構建的Smads轉錄激活檢測繫統能有效地用于Smad2、Smad3、Smad4功能的研究.
목적:구건Smads전록격활검측계통,이연구Smad2、Smad3、Smad4적공능.방법:장Smad2/3/4편마서렬이정학독마광여pRC-1ac재체중적Lac조알단백편마서렬융합구건중조질립,장중조질립여수Lac조종자조공적형광소매보고기인질립공전염293T세포,검측형광소매활성,기활성적강약즉대표전록활성적강약.결과:Smad2화Smad3구유교강적의뢰우TGF-β1적전록활성;Smad4전장몰유검측도전록활성,단기SAD결구역유불의뢰우TGF-β1적전록활성,MH2결구역유의뢰우TGF-β1적전록활성.결론:구건적Smads전록격활검측계통능유효지용우Smad2、Smad3、Smad4공능적연구.
