分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2008年
6期
729-734
,共6页
任世奇%王栩%唐宝军%胡国茂%李振甲%陈国南%林金明
任世奇%王栩%唐寶軍%鬍國茂%李振甲%陳國南%林金明
임세기%왕허%당보군%호국무%리진갑%진국남%림금명
孕酮%人血清%化学发光酶免疫分析%辣根过氧化物酶
孕酮%人血清%化學髮光酶免疫分析%辣根過氧化物酶
잉동%인혈청%화학발광매면역분석%랄근과양화물매
将抗兔IgG(即二抗)物理吸附于聚苯乙烯微孔板上作为通用固相,通过免疫反应制备固相抗体.采用辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种高通量、简便、快速的化学发光酶免疫分析方法用于临床测定人血清中的孕酮.对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、发光底物选择、发光反应时间及温育条件等进行了考察和优化,最终选定的实验条件:孕酮抗体和HRP标记物的最佳稀释度分别为1:10C1000和1:15000;选用Ⅱ号发光底物,发光反应10 min后测定;37℃水浴条件下温育1 h.对建立的方法进行了评价.该方法的灵敏度为0.08μg/L;批内和批间相对标准偏差均在15%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为101%、101%和94.4%(在87.8%～108%之间).使用本方法和经典的放射免疫法同时对36份人血清样品进行测定,结果显示,本方法与放射免疫分析方法相关性良好,其相关系数为0.9502.
將抗兔IgG(即二抗)物理吸附于聚苯乙烯微孔闆上作為通用固相,通過免疫反應製備固相抗體.採用辣根過氧化物酶催化魯米諾-過氧化氫化學髮光體繫,建立瞭一種高通量、簡便、快速的化學髮光酶免疫分析方法用于臨床測定人血清中的孕酮.對各種影響因素如免疫試劑的稀釋度、髮光底物選擇、髮光反應時間及溫育條件等進行瞭攷察和優化,最終選定的實驗條件:孕酮抗體和HRP標記物的最佳稀釋度分彆為1:10C1000和1:15000;選用Ⅱ號髮光底物,髮光反應10 min後測定;37℃水浴條件下溫育1 h.對建立的方法進行瞭評價.該方法的靈敏度為0.08μg/L;批內和批間相對標準偏差均在15%之內;低、中、高3箇不同濃度值樣品的平均迴收率分彆為101%、101%和94.4%(在87.8%～108%之間).使用本方法和經典的放射免疫法同時對36份人血清樣品進行測定,結果顯示,本方法與放射免疫分析方法相關性良好,其相關繫數為0.9502.
장항토IgG(즉이항)물리흡부우취분을희미공판상작위통용고상,통과면역반응제비고상항체.채용랄근과양화물매최화로미낙-과양화경화학발광체계,건립료일충고통량、간편、쾌속적화학발광매면역분석방법용우림상측정인혈청중적잉동.대각충영향인소여면역시제적희석도、발광저물선택、발광반응시간급온육조건등진행료고찰화우화,최종선정적실험조건:잉동항체화HRP표기물적최가희석도분별위1:10C1000화1:15000;선용Ⅱ호발광저물,발광반응10 min후측정;37℃수욕조건하온육1 h.대건립적방법진행료평개.해방법적령민도위0.08μg/L;비내화비간상대표준편차균재15%지내;저、중、고3개불동농도치양품적평균회수솔분별위101%、101%화94.4%(재87.8%～108%지간).사용본방법화경전적방사면역법동시대36빈인혈청양품진행측정,결과현시,본방법여방사면역분석방법상관성량호,기상관계수위0.9502.
