中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2008年
4期
130-138
,共9页
马晓燕%张颖%张伟%桑亚新%袁耀武%李英军
馬曉燕%張穎%張偉%桑亞新%袁耀武%李英軍
마효연%장영%장위%상아신%원요무%리영군
诺瓦克样病毒%反转录PCR%贝类%检测
諾瓦剋樣病毒%反轉錄PCR%貝類%檢測
낙와극양병독%반전록PCR%패류%검측
目的:从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录(RT)PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒(NLVs)的方法.方法:利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化甘氨酸缓冲液一聚乙二醇(PEG)病毒浓缩方法;同时比较异硫氰酸胍法、SDS一蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法4种RNA提取方法:对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证.结果:采用pH 9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%;利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限为8.1×102 RT-PCR50/5gg贝肉;实际检测贝类样品25件,其中3件样品为阳性,基因测序结果亦证实为阳性.结论:建立了一个灵敏度较高的RT-PCR检测贝类中诺瓦克样病毒的方法.
目的:從病毒富集和覈痠提取兩方麵進行探索,旨在建立一箇反轉錄(RT)PCR技術檢測貝類中諾瓦剋樣病毒(NLVs)的方法.方法:利用脊髓灰質炎病毒作為參照毒株,優化甘氨痠緩遲液一聚乙二醇(PEG)病毒濃縮方法;同時比較異硫氰痠胍法、SDS一蛋白酶K法、Trizol-異丙醇法、試劑盒法4種RNA提取方法:對市售貝類樣品進行瞭檢測,併利用基因測序對暘性樣品進行驗證.結果:採用pH 9.5甘氨痠緩遲液-16%聚乙二醇病毒濃縮法,病毒的迴收率為16.8%;利用Trizol-異丙醇法提取RNA,檢齣限為8.1×102 RT-PCR50/5gg貝肉;實際檢測貝類樣品25件,其中3件樣品為暘性,基因測序結果亦證實為暘性.結論:建立瞭一箇靈敏度較高的RT-PCR檢測貝類中諾瓦剋樣病毒的方法.
목적:종병독부집화핵산제취량방면진행탐색,지재건립일개반전록(RT)PCR기술검측패류중낙와극양병독(NLVs)적방법.방법:이용척수회질염병독작위삼조독주,우화감안산완충액일취을이순(PEG)병독농축방법;동시비교이류청산고법、SDS일단백매K법、Trizol-이병순법、시제합법4충RNA제취방법:대시수패류양품진행료검측,병이용기인측서대양성양품진행험증.결과:채용pH 9.5감안산완충액-16%취을이순병독농축법,병독적회수솔위16.8%;이용Trizol-이병순법제취RNA,검출한위8.1×102 RT-PCR50/5gg패육;실제검측패류양품25건,기중3건양품위양성,기인측서결과역증실위양성.결론:건립료일개령민도교고적RT-PCR검측패류중낙와극양병독적방법.
