PD-1核心启动子的获得及活性鉴定
PD-1핵심계동자적획득급활성감정
PD-1 Core Promoter Acquired and Identification
  • 万方数据
    生物技术通讯 생물기술통신
    LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
    2010年 3期 319-322 ,共4页

    侯建伟%秦鑫%李晶%舒震%陈霖%徐玉金%赵薇%张伟%张英起

    후건위%진흠%리정%서진%진림%서옥금%조미%장위%장영기

    PD-1%核心启动子%双萤光素酶报告基因%转录调控 PD-1%覈心啟動子%雙螢光素酶報告基因%轉錄調控
    PD-1%핵심계동자%쌍형광소매보고기인%전록조공
    目的:构建PD-1(programmed death receptor 1)全长启动子及不同截短体的报告基因,并对其转录活性进行检测.方法:通过PCR及双酶切方法,从人全血基因组DNA中获得PD-1基因编码序列,包含不同长度碱基的PD-1启动子序列,分别克隆到报告基因pGL3-Basic载体上,构建8个不同长度PD-1启动子的报告基因;用脂质体转染法将8个报告基因分别转染至Jurkat细胞系;采用双萤光素酶报告基因系统评估PD-1启动子的活性.结果:经PCR方法扩增出大小分别为1650、1450、1250、1128、874、674、474和274 bp的不同长度的PD-1启动子序列,测序正确(与GenBank报道一致),酶切鉴定正确;瞬时转染Jurkat细胞系后经报告基因检测,8个启动子均具有转录活性.结论:构建了PD-1启动子的报告基因,并证实均有转录活性,且以pGL3-1128活性最高,为PD-1的核心启动子,为进一步研究PD-1的转录调控奠定了实验基础.
    목적:구건PD-1(programmed death receptor 1)전장계동자급불동절단체적보고기인,병대기전록활성진행검측.방법:통과PCR급쌍매절방법,종인전혈기인조DNA중획득PD-1기인편마서렬,포함불동장도감기적PD-1계동자서렬,분별극륭도보고기인pGL3-Basic재체상,구건8개불동장도PD-1계동자적보고기인;용지질체전염법장8개보고기인분별전염지Jurkat세포계;채용쌍형광소매보고기인계통평고PD-1계동자적활성.결과:경PCR방법확증출대소분별위1650、1450、1250、1128、874、674、474화274 bp적불동장도적PD-1계동자서렬,측서정학(여GenBank보도일치),매절감정정학;순시전염Jurkat세포계후경보고기인검측,8개계동자균구유전록활성.결론:구건료PD-1계동자적보고기인,병증실균유전록활성,차이pGL3-1128활성최고,위PD-1적핵심계동자,위진일보연구PD-1적전록조공전정료실험기출.
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