浙江大学学报(农业与生命科学版)
浙江大學學報(農業與生命科學版)
절강대학학보(농업여생명과학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2011年
1期
13-21
,共9页
张寒英%胡江琴%向太和%梁海曼%王利琳
張寒英%鬍江琴%嚮太和%樑海曼%王利琳
장한영%호강금%향태화%량해만%왕리림
百脉根%LjCYC3 基因%正、反义表达载体%烟草
百脈根%LjCYC3 基因%正、反義錶達載體%煙草
백맥근%LjCYC3 기인%정、반의표체재체%연초
根据百脉根花对称性基因LjCYC3构建反义表达载体,经农杆菌介导正、反义LjCYC3基因转化烟草,以获得花型改变的转基因烟草植株,并根据表型选取正、反义各3株转基因植株和1株野生型植株进行Q-PCR分析,观察外源基因在远源植物中的作用和影响.PCR分析结果表明:转基因植株中正义基因和反义基因的转化率分别为62.5%和71%.表型观察显示:30%的正义转基因植株主要表现为花瓣和雄蕊数目减少;而40%的反义转基因植株表现为2朵花有一定程度的融合,花冠萼片有褪色现象,雄蕊端头有花瓣状结构,雌蕊2枚且与雄蕊有合生现象.Q-PCR分析结果表明:在正义转基因再生植株中,外源基因均高效表达,随着表达量的增加,花型变化更加明显;而在反义转基因再生植株中,外源基因也有表达,随着表达量的降低,花型变化更加明显;与正义基因表达量相比,反义基因表达量要小约150倍.本研究结果为下阶段用该基因转化花卉植物以改变花型、改良花卉品种打下了实验基础.
根據百脈根花對稱性基因LjCYC3構建反義錶達載體,經農桿菌介導正、反義LjCYC3基因轉化煙草,以穫得花型改變的轉基因煙草植株,併根據錶型選取正、反義各3株轉基因植株和1株野生型植株進行Q-PCR分析,觀察外源基因在遠源植物中的作用和影響.PCR分析結果錶明:轉基因植株中正義基因和反義基因的轉化率分彆為62.5%和71%.錶型觀察顯示:30%的正義轉基因植株主要錶現為花瓣和雄蕊數目減少;而40%的反義轉基因植株錶現為2朵花有一定程度的融閤,花冠萼片有褪色現象,雄蕊耑頭有花瓣狀結構,雌蕊2枚且與雄蕊有閤生現象.Q-PCR分析結果錶明:在正義轉基因再生植株中,外源基因均高效錶達,隨著錶達量的增加,花型變化更加明顯;而在反義轉基因再生植株中,外源基因也有錶達,隨著錶達量的降低,花型變化更加明顯;與正義基因錶達量相比,反義基因錶達量要小約150倍.本研究結果為下階段用該基因轉化花卉植物以改變花型、改良花卉品種打下瞭實驗基礎.
근거백맥근화대칭성기인LjCYC3구건반의표체재체,경농간균개도정、반의LjCYC3기인전화연초,이획득화형개변적전기인연초식주,병근거표형선취정、반의각3주전기인식주화1주야생형식주진행Q-PCR분석,관찰외원기인재원원식물중적작용화영향.PCR분석결과표명:전기인식주중정의기인화반의기인적전화솔분별위62.5%화71%.표형관찰현시:30%적정의전기인식주주요표현위화판화웅예수목감소;이40%적반의전기인식주표현위2타화유일정정도적융합,화관악편유퇴색현상,웅예단두유화판상결구,자예2매차여웅예유합생현상.Q-PCR분석결과표명:재정의전기인재생식주중,외원기인균고효표체,수착표체량적증가,화형변화경가명현;이재반의전기인재생식주중,외원기인야유표체,수착표체량적강저,화형변화경가명현;여정의기인표체량상비,반의기인표체량요소약150배.본연구결과위하계단용해기인전화화훼식물이개변화형、개량화훼품충타하료실험기출.