中国临床神经外科杂志
中國臨床神經外科雜誌
중국림상신경외과잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL NEUROSURGERY
2012年
1期
30-33
,共4页
吴俊%赖国政%叶飞%雷霆
吳俊%賴國政%葉飛%雷霆
오준%뢰국정%협비%뢰정
胶质瘤%U87细胞%RNA干扰%细胞周期检测点激酶%放射治疗
膠質瘤%U87細胞%RNA榦擾%細胞週期檢測點激酶%放射治療
효질류%U87세포%RNA간우%세포주기검측점격매%방사치료
目的 探讨慢病毒干扰细胞周期检测点激酶1、2(Chk1、Chk2)基因表达对脑胶质瘤细胞放射治疗敏感性的影响.方法 根据基因库数据提供的Chk1及Chk2基因核苷酸序列,各选择设计一条适合转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,构建慢病毒并转染胶质瘤细胞系U87细胞进行传代扩增.用实时PCR和免疫印迹法分别在mRNA和蛋白水平上测定Chk1及Chk2的表达.转染后U87胶质瘤细胞经X线照射48 h后,进行细胞周期和凋亡的检测.结果 成功包装慢病毒后转染U87细胞,实时PCR检测Chk1和Chk2的干扰效应,其抑制率分别为73.74%和85.12%.细胞周期检测显示照射组和照射干扰Chk2组的细胞大部分阻滞在G2/M期;照射干扰Chk1组细胞放射治疗后的凋亡率较对照组和干扰Chk2组细胞明显增高(P<0.05).结论 慢病毒转染细胞可以有效的将干扰Chk1和干扰Chk2基因带到U87细胞并发挥作用,干扰Chk1和Chk2可以增加U87细胞对放射治疗的敏感性,为胶质瘤的治疗提供了新的治疗途径.
目的 探討慢病毒榦擾細胞週期檢測點激酶1、2(Chk1、Chk2)基因錶達對腦膠質瘤細胞放射治療敏感性的影響.方法 根據基因庫數據提供的Chk1及Chk2基因覈苷痠序列,各選擇設計一條適閤轉錄短髮夾RNA(shRNA)的DNA序列,構建慢病毒併轉染膠質瘤細胞繫U87細胞進行傳代擴增.用實時PCR和免疫印跡法分彆在mRNA和蛋白水平上測定Chk1及Chk2的錶達.轉染後U87膠質瘤細胞經X線照射48 h後,進行細胞週期和凋亡的檢測.結果 成功包裝慢病毒後轉染U87細胞,實時PCR檢測Chk1和Chk2的榦擾效應,其抑製率分彆為73.74%和85.12%.細胞週期檢測顯示照射組和照射榦擾Chk2組的細胞大部分阻滯在G2/M期;照射榦擾Chk1組細胞放射治療後的凋亡率較對照組和榦擾Chk2組細胞明顯增高(P<0.05).結論 慢病毒轉染細胞可以有效的將榦擾Chk1和榦擾Chk2基因帶到U87細胞併髮揮作用,榦擾Chk1和Chk2可以增加U87細胞對放射治療的敏感性,為膠質瘤的治療提供瞭新的治療途徑.
목적 탐토만병독간우세포주기검측점격매1、2(Chk1、Chk2)기인표체대뇌효질류세포방사치료민감성적영향.방법 근거기인고수거제공적Chk1급Chk2기인핵감산서렬,각선택설계일조괄합전록단발협RNA(shRNA)적DNA서렬,구건만병독병전염효질류세포계U87세포진행전대확증.용실시PCR화면역인적법분별재mRNA화단백수평상측정Chk1급Chk2적표체.전염후U87효질류세포경X선조사48 h후,진행세포주기화조망적검측.결과 성공포장만병독후전염U87세포,실시PCR검측Chk1화Chk2적간우효응,기억제솔분별위73.74%화85.12%.세포주기검측현시조사조화조사간우Chk2조적세포대부분조체재G2/M기;조사간우Chk1조세포방사치료후적조망솔교대조조화간우Chk2조세포명현증고(P<0.05).결론 만병독전염세포가이유효적장간우Chk1화간우Chk2기인대도U87세포병발휘작용,간우Chk1화Chk2가이증가U87세포대방사치료적민감성,위효질류적치료제공료신적치료도경.
