CAJ | 학술논문

选择6种保护剂、2种玻璃化方式和2种低温处理方式对连香树定芽的冷藏条件进行筛选,用TTC还原法测定冷藏定芽的细胞存活率,并用电子显微镜观察定芽细胞冷冻时的受损情况,以优选连香树定芽的冷藏技术条件.结果表明:(1)保护剂、玻璃化方式、冷藏温度均对莲香树定芽的细胞存活率具有显著影响,不同冷藏处理的定芽组织细胞内冰晶形状、数量不同,细胞破裂数也不同.(2)连香树定芽的最佳冷藏条件为:用含甘油35.0 mL、乙烯乙二醇20.0 mL、DMSO 15.0 mL、甘氨酸1.0 mg和3％蔗糖脱氨MS液体培养基组成的100mL保护剂于真空下浸泡30 min,再经-20℃预冻处理6h后,于液氮中玻璃化和冷藏60d,其定芽细胞的存活率最高,相对存活率达95％.(3)细胞微结构观察显示,在该优选条件下明显抑制了连香树定芽细胞内冰晶体的形成,消除了冰晶对细胞的涨破和刺伤,其细胞结构完整无损伤.
선택6충보호제、2충파리화방식화2충저온처리방식대련향수정아적랭장조건진행사선,용TTC환원법측정랭장정아적세포존활솔,병용전자현미경관찰정아세포냉동시적수손정황,이우선련향수정아적랭장기술조건.결과표명:(1)보호제、파리화방식、랭장온도균대련향수정아적세포존활솔구유현저영향,불동랭장처리적정아조직세포내빙정형상、수량불동,세포파렬수야불동.(2)련향수정아적최가랭장조건위:용함감유35.0 mL、을희을이순20.0 mL、DMSO 15.0 mL、감안산1.0 mg화3％자당탈안MS액체배양기조성적100mL보호제우진공하침포30 min,재경-20℃예동처리6h후,우액담중파리화화랭장60d,기정아세포적존활솔최고,상대존활솔체95％.(3)세포미결구관찰현시,재해우선조건하명현억제료련향수정아세포내빙정체적형성,소제료빙정대세포적창파화자상,기세포결구완정무손상.