感染、炎症、修复
感染、炎癥、脩複
감염、염증、수복
INFECTION， INFLAMMATION， REPAIR
2012年
2期
74-78
,共5页
龙燕%郑磊%曾方银%王前
龍燕%鄭磊%曾方銀%王前
룡연%정뢰%증방은%왕전
真菌%光滑假丝酵母菌%实时荧光定量PCR
真菌%光滑假絲酵母菌%實時熒光定量PCR
진균%광활가사효모균%실시형광정량PCR
目的:建立、优化快速检测临床标本中光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法,并评价其临床应用价值.方法:以光滑假丝酵母菌ITSⅡ基因的一段高度保守序列为扩增靶序列,合成引物和探针,并与pMD19-T构建重组质粒作为标准品,建立检测光滑假丝酵母菌的实时定量荧光PCR方法.从线性范围、重复性、敏感性、特异性等4个方面对反应体系进行方法学评价.用建立的实时荧光定量PCR方法对1 042例临床标本(包括血液、尿液、痰液、胸水、支气管肺泡灌洗液)进行检测,并与真菌培养法进行比较.结果:建立的光滑假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法的灵敏度可达10 CFU/ml；与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应.重复检测样本,其循环阈值的试验内及试验间变异系数均小于10％.用于临床标本检测时共检出96份阳性标本,与真菌培养法(检出93份阳性标本)的一致性好(Kappa值为0.925).结论:实时荧光定量PCR方法检测光滑假丝酵母菌灵敏度高、特异性及重复性好；可直接用于各种临床标本中光滑假丝酵母菌的检测,能大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据.
目的:建立、優化快速檢測臨床標本中光滑假絲酵母菌的實時熒光定量PCR方法,併評價其臨床應用價值.方法:以光滑假絲酵母菌ITSⅡ基因的一段高度保守序列為擴增靶序列,閤成引物和探針,併與pMD19-T構建重組質粒作為標準品,建立檢測光滑假絲酵母菌的實時定量熒光PCR方法.從線性範圍、重複性、敏感性、特異性等4箇方麵對反應體繫進行方法學評價.用建立的實時熒光定量PCR方法對1 042例臨床標本(包括血液、尿液、痰液、胸水、支氣管肺泡灌洗液)進行檢測,併與真菌培養法進行比較.結果:建立的光滑假絲酵母菌實時熒光定量PCR方法的靈敏度可達10 CFU/ml；與人類基因組、細菌及其他真菌無交扠暘性反應.重複檢測樣本,其循環閾值的試驗內及試驗間變異繫數均小于10％.用于臨床標本檢測時共檢齣96份暘性標本,與真菌培養法(檢齣93份暘性標本)的一緻性好(Kappa值為0.925).結論:實時熒光定量PCR方法檢測光滑假絲酵母菌靈敏度高、特異性及重複性好；可直接用于各種臨床標本中光滑假絲酵母菌的檢測,能大大縮短報告時間,為臨床診斷提供可靠依據.
목적:건립、우화쾌속검측림상표본중광활가사효모균적실시형광정량PCR방법,병평개기림상응용개치.방법:이광활가사효모균ITSⅡ기인적일단고도보수서렬위확증파서렬,합성인물화탐침,병여pMD19-T구건중조질립작위표준품,건립검측광활가사효모균적실시정량형광PCR방법.종선성범위、중복성、민감성、특이성등4개방면대반응체계진행방법학평개.용건립적실시형광정량PCR방법대1 042례림상표본(포괄혈액、뇨액、담액、흉수、지기관폐포관세액)진행검측,병여진균배양법진행비교.결과:건립적광활가사효모균실시형광정량PCR방법적령민도가체10 CFU/ml；여인류기인조、세균급기타진균무교차양성반응.중복검측양본,기순배역치적시험내급시험간변이계수균소우10％.용우림상표본검측시공검출96빈양성표본,여진균배양법(검출93빈양성표본)적일치성호(Kappa치위0.925).결론:실시형광정량PCR방법검측광활가사효모균령민도고、특이성급중복성호；가직접용우각충림상표본중광활가사효모균적검측,능대대축단보고시간,위림상진단제공가고의거.
