中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
10期
1791-1795
,共5页
夏小慧%胡扬%张腾国%陈婷
夏小慧%鬍颺%張騰國%陳婷
하소혜%호양%장등국%진정
葡萄糖转运蛋白4%基因多态性%基因表达
葡萄糖轉運蛋白4%基因多態性%基因錶達
포도당전운단백4%기인다태성%기인표체
目的:研究葡萄糖转运蛋白4(SLC2A4)基因启动子区rs5418多态位点G→A变异对基因表达的影响.方法:PCR法扩增SLC2A4基因核心启动子区序列.采用基因重组、定点突变等技术,构建rs5418位点含有不同等位基因的SLC2A4基因启动子重组表达载体.脂质体转染法将重组质粒转入HEK293T细胞,采用双萤光素酶报告系统,观察携带不同等位基因的重组质粒中下游报告基因的表达活性.结果:PCR扩增获得长度为716 bp的SLC2A4基因核心启动子序列,成功构建pGL3-SLC2A4-prom(A)和pGL3-SLC2A4-prom(G)重组表达载体.双萤光素酶报告基因活性检测结果显示,携带A等位基因的载体启动下游报告基因表达的相对活性(19.49±4 41)比携带G等位基因的载体(13.04±4.45)强,两者存在显著差异(P<0.05).结论:SLC2A4基因启动子区rs5418位点的G→A突变能显著增强启动子活性,从而影响SLC2A4基因表达活性.
目的:研究葡萄糖轉運蛋白4(SLC2A4)基因啟動子區rs5418多態位點G→A變異對基因錶達的影響.方法:PCR法擴增SLC2A4基因覈心啟動子區序列.採用基因重組、定點突變等技術,構建rs5418位點含有不同等位基因的SLC2A4基因啟動子重組錶達載體.脂質體轉染法將重組質粒轉入HEK293T細胞,採用雙螢光素酶報告繫統,觀察攜帶不同等位基因的重組質粒中下遊報告基因的錶達活性.結果:PCR擴增穫得長度為716 bp的SLC2A4基因覈心啟動子序列,成功構建pGL3-SLC2A4-prom(A)和pGL3-SLC2A4-prom(G)重組錶達載體.雙螢光素酶報告基因活性檢測結果顯示,攜帶A等位基因的載體啟動下遊報告基因錶達的相對活性(19.49±4 41)比攜帶G等位基因的載體(13.04±4.45)彊,兩者存在顯著差異(P<0.05).結論:SLC2A4基因啟動子區rs5418位點的G→A突變能顯著增彊啟動子活性,從而影響SLC2A4基因錶達活性.
목적:연구포도당전운단백4(SLC2A4)기인계동자구rs5418다태위점G→A변이대기인표체적영향.방법:PCR법확증SLC2A4기인핵심계동자구서렬.채용기인중조、정점돌변등기술,구건rs5418위점함유불동등위기인적SLC2A4기인계동자중조표체재체.지질체전염법장중조질립전입HEK293T세포,채용쌍형광소매보고계통,관찰휴대불동등위기인적중조질립중하유보고기인적표체활성.결과:PCR확증획득장도위716 bp적SLC2A4기인핵심계동자서렬,성공구건pGL3-SLC2A4-prom(A)화pGL3-SLC2A4-prom(G)중조표체재체.쌍형광소매보고기인활성검측결과현시,휴대A등위기인적재체계동하유보고기인표체적상대활성(19.49±4 41)비휴대G등위기인적재체(13.04±4.45)강,량자존재현저차이(P<0.05).결론:SLC2A4기인계동자구rs5418위점적G→A돌변능현저증강계동자활성,종이영향SLC2A4기인표체활성.
