CAJ | 학술논문

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因在诱导肝癌细胞凋亡时是否存在旁观者效应,以及旁观者效应的可能机制.方法构建表达TRAIL基因的双腺病毒载体系统Ad/GT-TRAIL+Ad/PGK-GVl6,通过293包装细胞产生的病毒上清液将TRAIL基因转入肝癌细胞SMMC7721细胞中,RT-PCR检测TRAIL基因的表达,以MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率;不同比例混合培养SMMC7721/TRAIL和SMMC7721细胞,检测混合细胞生长抑制率来评价TRAIL基因的旁观者效应,并以滤去细胞成分的转染细胞培养液培养未转染细胞,观测可溶性因子在TRAIl基因旁观者效应中的作用.结果TRAIL基因对SMMC7721细胞的生长抑制率与PBS、LacZ基因和Bax基因比较,差异有显著性(P＜0 05);SMMC7721细胞的凋亡率,TRAIL基因与PBS、LacZ基因和Bax基因比较,差异有显著性(P＜0.05);混合细胞的生长抑制率,以SMMC7721/TRAIL占0%时为0,占5%时为15.9%,占25%时为67.0%,占50%时为80.2%,占100%时为87.7%;以PBS对SMMC772l的生长抑制率为0,则滤去细胞成分的转染细胞培养液对SMMC7721的生长抑制率为4%,两者差异无显著性.结论双腺病毒载体系统介导的TRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,并存在旁观者效应,可溶性因子在TRAIL的旁观者效应中不起作用.
목적탐토종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL)기인재유도간암세포조망시시부존재방관자효응,이급방관자효응적가능궤제.방법구건표체TRAIL기인적쌍선병독재체계통Ad/GT-TRAIL+Ad/PGK-GVl6,통과293포장세포산생적병독상청액장TRAIL기인전입간암세포SMMC7721세포중,RT-PCR검측TRAIL기인적표체,이MTT법검측세포생장억제솔,류식세포의검측세포조망솔;불동비례혼합배양SMMC7721/TRAIL화SMMC7721세포,검측혼합세포생장억제솔래평개TRAIL기인적방관자효응,병이려거세포성분적전염세포배양액배양미전염세포,관측가용성인자재TRAIl기인방관자효응중적작용.결과TRAIL기인대SMMC7721세포적생장억제솔여PBS、LacZ기인화Bax기인비교,차이유현저성(P＜0 05);SMMC7721세포적조망솔,TRAIL기인여PBS、LacZ기인화Bax기인비교,차이유현저성(P＜0.05);혼합세포적생장억제솔,이SMMC7721/TRAIL점0%시위0,점5%시위15.9%,점25%시위67.0%,점50%시위80.2%,점100%시위87.7%;이PBS대SMMC772l적생장억제솔위0,칙려거세포성분적전염세포배양액대SMMC7721적생장억제솔위4%,량자차이무현저성.결론쌍선병독재체계통개도적TRAIL기인대간암세포유명현적억제생장화촉조망작용,병존재방관자효응,가용성인자재TRAIL적방관자효응중불기작용.