中华男科学杂志
中華男科學雜誌
중화남과학잡지
NATIONAL JOURNAL OF ANDROLOGY
2006年
4期
308-311,314
,共5页
张世庆%李德雪%李恩中%王常勇%张学明%鲁景艳
張世慶%李德雪%李恩中%王常勇%張學明%魯景豔
장세경%리덕설%리은중%왕상용%장학명%로경염
Bmi1基因%睾丸%克隆%表达%小鼠
Bmi1基因%睪汍%剋隆%錶達%小鼠
Bmi1기인%고환%극륭%표체%소서
目的: 克隆小鼠Bmi1 cDNA并进行原核表达,为下一步制备BMI1多克隆抗体奠定基础. 方法: 从小鼠睾丸组织中克隆Bmi1 cDNA,测序并利用BLAST程序比对证明该基因序列正确后,构建原核表达载体pET-28c-Bmi1,将其转入大肠埃希菌BL21中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并通过免疫印迹检测重组目的蛋白. 结果: 成功克隆了小鼠Bmi1 cDNA,原核表达的融合蛋白可与His标签抗体和BMI1单克隆抗体特异性结合. 结论: 小鼠睾丸组织中Bmi1 基因有表达;成功克隆了小鼠Bmi1 cDNA并在大肠埃希菌BL21中正确表达了重组蛋白rBMI1.
目的: 剋隆小鼠Bmi1 cDNA併進行原覈錶達,為下一步製備BMI1多剋隆抗體奠定基礎. 方法: 從小鼠睪汍組織中剋隆Bmi1 cDNA,測序併利用BLAST程序比對證明該基因序列正確後,構建原覈錶達載體pET-28c-Bmi1,將其轉入大腸埃希菌BL21中,異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達併通過免疫印跡檢測重組目的蛋白. 結果: 成功剋隆瞭小鼠Bmi1 cDNA,原覈錶達的融閤蛋白可與His標籤抗體和BMI1單剋隆抗體特異性結閤. 結論: 小鼠睪汍組織中Bmi1 基因有錶達;成功剋隆瞭小鼠Bmi1 cDNA併在大腸埃希菌BL21中正確錶達瞭重組蛋白rBMI1.
목적: 극륭소서Bmi1 cDNA병진행원핵표체,위하일보제비BMI1다극륭항체전정기출. 방법: 종소서고환조직중극륭Bmi1 cDNA,측서병이용BLAST정서비대증명해기인서렬정학후,구건원핵표체재체pET-28c-Bmi1,장기전입대장애희균BL21중,이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체병통과면역인적검측중조목적단백. 결과: 성공극륭료소서Bmi1 cDNA,원핵표체적융합단백가여His표첨항체화BMI1단극륭항체특이성결합. 결론: 소서고환조직중Bmi1 기인유표체;성공극륭료소서Bmi1 cDNA병재대장애희균BL21중정학표체료중조단백rBMI1.
