核农学报
覈農學報
핵농학보
ACTA AGRICULTURAE NUCLEATAE SINICA
2006年
4期
287-291,302
,共6页
毕静华%高月%刘永立%叶庆富
畢靜華%高月%劉永立%葉慶富
필정화%고월%류영립%협경부
阔叶猕猴桃%根癌农杆菌%抗生素%Gus%叶片%再生
闊葉獼猴桃%根癌農桿菌%抗生素%Gus%葉片%再生
활협미후도%근암농간균%항생소%Gus%협편%재생
以阔叶猕猴桃(Actinidia latifolia)叶片为外植体,研究了各种抗生素对形态分化和器官形成的影响,并以叶盘为受体,通过根癌农杆菌介导法获得了抗性愈伤组织和抗性芽,组织化学染色表明gus基因已在植物组织中表达.研究结果表明,对不定芽分化来说,头孢霉素(Cef)效果明显好于羧苄青霉素(Carb).Cef浓度为300mg·L-1时效果最好,再生频率达100%,平均再生芽数达最大为9.76个芽/外植体.生根过程中高浓度的Cef(≥200mg·L-1)明显抑制生根,而Carb对生根没有显著影响.在卡那霉素(Kan)和Carb组合处理中,Carb对生根没有显著影响,但Kan明显抑制生根.随着Kan浓度的升高,生根率和平均根数迅速减少,当浓度升高到50mg·L-1时,生根完全被抑制.因此,农杆菌介导的阔叶猕猴桃遗传转化中愈伤组织和不定芽诱导过程宜选用300mg·L-1Cef来抑制农杆菌生长,Kan筛选的临界浓度为20mg·L-1.在抗性芽生根过程中Kan浓度应该控制在50mg·L-1以内,并改用Carb作为杀菌剂,生根效果会更好.该研究确定了农杆菌介导的阔叶猕猴桃叶片遗传转化中使用抗生素的种类和用量,为通过基因工程对阔叶猕猴桃进行遗传改良奠定了基础.
以闊葉獼猴桃(Actinidia latifolia)葉片為外植體,研究瞭各種抗生素對形態分化和器官形成的影響,併以葉盤為受體,通過根癌農桿菌介導法穫得瞭抗性愈傷組織和抗性芽,組織化學染色錶明gus基因已在植物組織中錶達.研究結果錶明,對不定芽分化來說,頭孢黴素(Cef)效果明顯好于羧芐青黴素(Carb).Cef濃度為300mg·L-1時效果最好,再生頻率達100%,平均再生芽數達最大為9.76箇芽/外植體.生根過程中高濃度的Cef(≥200mg·L-1)明顯抑製生根,而Carb對生根沒有顯著影響.在卡那黴素(Kan)和Carb組閤處理中,Carb對生根沒有顯著影響,但Kan明顯抑製生根.隨著Kan濃度的升高,生根率和平均根數迅速減少,噹濃度升高到50mg·L-1時,生根完全被抑製.因此,農桿菌介導的闊葉獼猴桃遺傳轉化中愈傷組織和不定芽誘導過程宜選用300mg·L-1Cef來抑製農桿菌生長,Kan篩選的臨界濃度為20mg·L-1.在抗性芽生根過程中Kan濃度應該控製在50mg·L-1以內,併改用Carb作為殺菌劑,生根效果會更好.該研究確定瞭農桿菌介導的闊葉獼猴桃葉片遺傳轉化中使用抗生素的種類和用量,為通過基因工程對闊葉獼猴桃進行遺傳改良奠定瞭基礎.
이활협미후도(Actinidia latifolia)협편위외식체,연구료각충항생소대형태분화화기관형성적영향,병이협반위수체,통과근암농간균개도법획득료항성유상조직화항성아,조직화학염색표명gus기인이재식물조직중표체.연구결과표명,대불정아분화래설,두포매소(Cef)효과명현호우최변청매소(Carb).Cef농도위300mg·L-1시효과최호,재생빈솔체100%,평균재생아수체최대위9.76개아/외식체.생근과정중고농도적Cef(≥200mg·L-1)명현억제생근,이Carb대생근몰유현저영향.재잡나매소(Kan)화Carb조합처리중,Carb대생근몰유현저영향,단Kan명현억제생근.수착Kan농도적승고,생근솔화평균근수신속감소,당농도승고도50mg·L-1시,생근완전피억제.인차,농간균개도적활협미후도유전전화중유상조직화불정아유도과정의선용300mg·L-1Cef래억제농간균생장,Kan사선적림계농도위20mg·L-1.재항성아생근과정중Kan농도응해공제재50mg·L-1이내,병개용Carb작위살균제,생근효과회경호.해연구학정료농간균개도적활협미후도협편유전전화중사용항생소적충류화용량,위통과기인공정대활협미후도진행유전개량전정료기출.
