CAJ | 학술논문

根据鹅细小病毒(GPV)B株全基因序列,设计并合成了1对特异性引物,采用PCR技术对GPV GD-01株的VP3基因进行扩增,将目的基因克隆到pGEM(R)-T后测序,分析了GPV GD-01株VP3基因的遗传变异情况,并进行原核表达.结果表明,GPV GD-01株VP3基因全长1605bp,编码534个氨基酸(DQ665790),与已发表的GPV、番鸭细小病毒(MDPV)的核苷酸、氨基酸同源性分别为96.15%、80.1%,97.78%、89.13%,说明GPV VP3基因具有较高的遗传稳定性.结合亲水性、表面极性、抗原位点分析比较GPV、MDPV VP3基因,为研究GPV和MDPV感染谱差异的分子机制提供了一定的理论基础.原核表达显示,VP3蛋白的最高表达量占整个菌体蛋白含量的29.9%,经表达条件优化可产生大量可溶性VP3表达蛋白.SDS-PAGE与Western-blot分析显示,表达的VP3蛋白的相对分子质量约60000,并能与鼠抗GPV阳性血清反应,证明具有一定的反应原性,为进一步研制基因工程疫苗及诊断制品奠定了基础.
근거아세소병독(GPV)B주전기인서렬,설계병합성료1대특이성인물,채용PCR기술대GPV GD-01주적VP3기인진행확증,장목적기인극륭도pGEM(R)-T후측서,분석료GPV GD-01주VP3기인적유전변이정황,병진행원핵표체.결과표명,GPV GD-01주VP3기인전장1605bp,편마534개안기산(DQ665790),여이발표적GPV、번압세소병독(MDPV)적핵감산、안기산동원성분별위96.15%、80.1%,97.78%、89.13%,설명GPV VP3기인구유교고적유전은정성.결합친수성、표면겁성、항원위점분석비교GPV、MDPV VP3기인,위연구GPV화MDPV감염보차이적분자궤제제공료일정적이론기출.원핵표체현시,VP3단백적최고표체량점정개균체단백함량적29.9%,경표체조건우화가산생대량가용성VP3표체단백.SDS-PAGE여Western-blot분석현시,표체적VP3단백적상대분자질량약60000,병능여서항GPV양성혈청반응,증명구유일정적반응원성,위진일보연제기인공정역묘급진단제품전정료기출.