CAJ | 학술논문

目的:探讨EGFR/HER2基因沉默对非小细胞肺癌细胞株EGFR酪氨酸激酶信号转导通路的交互影响及其与细胞增殖、凋亡和周期改变的关系.方法:设计并合成EGFR、HER2及 EGFR/HER2共干扰序列,构建含干扰序列的载体,进行瞬时转染;应用实时荧光定量、蛋白印迹法检测基因沉默效果;用四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞仪检测基因沉默后生物学特性改变;蛋白印迹法检测EGFR下游信号通路蛋白Akt、p-Akt、p-Erk1/2、p-p38表达水平变化;采用SPSS13.0软件分析结果.结果:在SPC-A-1细胞系中,EGFR干扰组、HER2干扰组、EGFR联合HER2干扰组和EGFR-HER2共干扰组体外细胞增殖率均有下降趋势;除EGFR干扰外,其余各组均可诱发凋亡;各组的细胞周期G1期和S期细胞比例有显著改变;基因沉默效果检测显示EGFR和HER2基因蛋白水平被下调.下游信号通路蛋白检测示EGFR下游信号通路蛋白Akt、p-Akt、p-Erk1/2、p-p38表达水平和细胞增殖、凋亡以及细胞周期改变之间未发现明显相关规律.结论:单纯EGFR干扰SPC-A-1细胞不能诱发显著凋亡,HER2和EGFR/HER2基因共沉默后诱发的人肺腺癌SPC-A-1细胞凋亡比阴性对照显著增加.EGFR/HER2基因沉默后诱发的细胞增殖、凋亡和细胞周期改变与EGFR家族下游信号通路蛋白之间未发现显著相关关系.
목적:탐토EGFR/HER2기인침묵대비소세포폐암세포주EGFR락안산격매신호전도통로적교호영향급기여세포증식、조망화주기개변적관계.방법:설계병합성EGFR、HER2급 EGFR/HER2공간우서렬,구건함간우서렬적재체,진행순시전염;응용실시형광정량、단백인적법검측기인침묵효과;용사갑기우담서염비색법、류식세포의검측기인침묵후생물학특성개변;단백인적법검측EGFR하유신호통로단백Akt、p-Akt、p-Erk1/2、p-p38표체수평변화;채용SPSS13.0연건분석결과.결과:재SPC-A-1세포계중,EGFR간우조、HER2간우조、EGFR연합HER2간우조화EGFR-HER2공간우조체외세포증식솔균유하강추세;제EGFR간우외,기여각조균가유발조망;각조적세포주기G1기화S기세포비례유현저개변;기인침묵효과검측현시EGFR화HER2기인단백수평피하조.하유신호통로단백검측시EGFR하유신호통로단백Akt、p-Akt、p-Erk1/2、p-p38표체수평화세포증식、조망이급세포주기개변지간미발현명현상관규률.결론:단순EGFR간우SPC-A-1세포불능유발현저조망,HER2화EGFR/HER2기인공침묵후유발적인폐선암SPC-A-1세포조망비음성대조현저증가.EGFR/HER2기인침묵후유발적세포증식、조망화세포주기개변여EGFR가족하유신호통로단백지간미발현현저상관관계.