中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2010年
10期
885-889,894
,共6页
吴丽娜%魏林%杨建岭%石文凯%霍明山%李彩霞%崔玉秀%曾瑞红
吳麗娜%魏林%楊建嶺%石文凱%霍明山%李綵霞%崔玉秀%曾瑞紅
오려나%위림%양건령%석문개%곽명산%리채하%최옥수%증서홍
TERT%CD4+T细胞表位%CD8+T细胞表位%meTERT%细胞免疫
TERT%CD4+T細胞錶位%CD8+T細胞錶位%meTERT%細胞免疫
TERT%CD4+T세포표위%CD8+T세포표위%meTERT%세포면역
目的:制备端粒酶逆转录酶(TERT)的多表位(meTERT)肽疫苗和DNA疫苗,免疫小鼠,对其免疫原性进行初步研究.方法:用重叠延伸PCR将TERT的多个CD4+和CD8+T细胞表位串联连接,得meTERT的DNA片段;将该片段分别连接到真核表达载体pcDNA3.1及原核表达载体pGEX-4T中,制备DNA疫苗(PCT),并原核表达多表位肽疫苗(PCG);皮下/肌肉(50 μg/100 μg)免疫小鼠3次,取脾细胞,用ELISPOT法检测分泌IFN-γ和IL-4的细胞频率;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性脾细胞杀伤率(抗原刺激的SP2/0细胞为靶细胞).结果:成功制备meTERT的PCT和PCG疫苗;动物实验表明:PCT+PCG联合免疫诱导的分泌IFN-γ的淋巴细胞数量显著高于其它各组(P<0.01);另外,PCT+PCG诱导的分泌IFN-γ的淋巴细胞数显著高于分泌IL-4的数量;PCT+PCG联合免疫诱导了显著的脾细胞杀伤活性(67.8%).结论:含多个CD4+和CD8+T细胞表位的meTERT的DNA疫苗PCT和多表位肽疫苗PCG联合免疫能够诱导强烈的Th1和CTL细胞免疫应答.
目的:製備耑粒酶逆轉錄酶(TERT)的多錶位(meTERT)肽疫苗和DNA疫苗,免疫小鼠,對其免疫原性進行初步研究.方法:用重疊延伸PCR將TERT的多箇CD4+和CD8+T細胞錶位串聯連接,得meTERT的DNA片段;將該片段分彆連接到真覈錶達載體pcDNA3.1及原覈錶達載體pGEX-4T中,製備DNA疫苗(PCT),併原覈錶達多錶位肽疫苗(PCG);皮下/肌肉(50 μg/100 μg)免疫小鼠3次,取脾細胞,用ELISPOT法檢測分泌IFN-γ和IL-4的細胞頻率;用乳痠脫氫酶(LDH)釋放法檢測特異性脾細胞殺傷率(抗原刺激的SP2/0細胞為靶細胞).結果:成功製備meTERT的PCT和PCG疫苗;動物實驗錶明:PCT+PCG聯閤免疫誘導的分泌IFN-γ的淋巴細胞數量顯著高于其它各組(P<0.01);另外,PCT+PCG誘導的分泌IFN-γ的淋巴細胞數顯著高于分泌IL-4的數量;PCT+PCG聯閤免疫誘導瞭顯著的脾細胞殺傷活性(67.8%).結論:含多箇CD4+和CD8+T細胞錶位的meTERT的DNA疫苗PCT和多錶位肽疫苗PCG聯閤免疫能夠誘導彊烈的Th1和CTL細胞免疫應答.
목적:제비단립매역전록매(TERT)적다표위(meTERT)태역묘화DNA역묘,면역소서,대기면역원성진행초보연구.방법:용중첩연신PCR장TERT적다개CD4+화CD8+T세포표위천련련접,득meTERT적DNA편단;장해편단분별련접도진핵표체재체pcDNA3.1급원핵표체재체pGEX-4T중,제비DNA역묘(PCT),병원핵표체다표위태역묘(PCG);피하/기육(50 μg/100 μg)면역소서3차,취비세포,용ELISPOT법검측분비IFN-γ화IL-4적세포빈솔;용유산탈경매(LDH)석방법검측특이성비세포살상솔(항원자격적SP2/0세포위파세포).결과:성공제비meTERT적PCT화PCG역묘;동물실험표명:PCT+PCG연합면역유도적분비IFN-γ적림파세포수량현저고우기타각조(P<0.01);령외,PCT+PCG유도적분비IFN-γ적림파세포수현저고우분비IL-4적수량;PCT+PCG연합면역유도료현저적비세포살상활성(67.8%).결론:함다개CD4+화CD8+T세포표위적meTERT적DNA역묘PCT화다표위태역묘PCG연합면역능구유도강렬적Th1화CTL세포면역응답.
