中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2004年
12期
1452-1455
,共4页
刘永靖%徐志飞%苏长青%薛惠斌%崔贞福%李林芳%钱炎珍%钱其军
劉永靖%徐誌飛%囌長青%薛惠斌%崔貞福%李林芳%錢炎珍%錢其軍
류영정%서지비%소장청%설혜빈%최정복%리림방%전염진%전기군
基因治疗%腺病毒%肿瘤%脱噬作用
基因治療%腺病毒%腫瘤%脫噬作用
기인치료%선병독%종류%탈서작용
目的构建携带人肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因的腺病毒载体,评价TRAIL对人肺癌、肝癌细胞的基因治疗功效.方法构建携带人TRAIL基因的腺病毒Ad-hTRAIL,感染人肺癌细胞株H460、A549,人肝癌细胞株Hep3B、HepGII以及人正常肝细胞株WRL-68,人正常成纤维细胞株MRC-5,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测hTRAIL的表达,并进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其杀伤肿瘤细胞的效能.结果成功构建携带人TRAIL基因的增殖缺陷型腺病毒载体Ad-hTRAIL,感染H460、A549、Hep3B、HepGII、WRL-68细胞,72 h后上清中TRAIL表达量分别为32.75、24.53、34.02、32.89、17.08 μg/L.在MOI=1时,Ad-hTRAIL即可引起肿瘤细胞明显凋亡,而在MOI=100时对正常细胞WRL-68、MRC-5也没有明显杀伤作用.结论腺病毒载体携带人TRAIL基因在肿瘤基因治疗方面有非常广阔的应用前景.
目的構建攜帶人腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體(TRAIL)基因的腺病毒載體,評價TRAIL對人肺癌、肝癌細胞的基因治療功效.方法構建攜帶人TRAIL基因的腺病毒Ad-hTRAIL,感染人肺癌細胞株H460、A549,人肝癌細胞株Hep3B、HepGII以及人正常肝細胞株WRL-68,人正常成纖維細胞株MRC-5,通過酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測hTRAIL的錶達,併進行四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測其殺傷腫瘤細胞的效能.結果成功構建攜帶人TRAIL基因的增殖缺陷型腺病毒載體Ad-hTRAIL,感染H460、A549、Hep3B、HepGII、WRL-68細胞,72 h後上清中TRAIL錶達量分彆為32.75、24.53、34.02、32.89、17.08 μg/L.在MOI=1時,Ad-hTRAIL即可引起腫瘤細胞明顯凋亡,而在MOI=100時對正常細胞WRL-68、MRC-5也沒有明顯殺傷作用.結論腺病毒載體攜帶人TRAIL基因在腫瘤基因治療方麵有非常廣闊的應用前景.
목적구건휴대인종류배사인자상관적조망유도배체(TRAIL)기인적선병독재체,평개TRAIL대인폐암、간암세포적기인치료공효.방법구건휴대인TRAIL기인적선병독Ad-hTRAIL,감염인폐암세포주H460、A549,인간암세포주Hep3B、HepGII이급인정상간세포주WRL-68,인정상성섬유세포주MRC-5,통과매련면역흡부시험(ELISA)검측hTRAIL적표체,병진행사갑기우담서람(MTT)비색법검측기살상종류세포적효능.결과성공구건휴대인TRAIL기인적증식결함형선병독재체Ad-hTRAIL,감염H460、A549、Hep3B、HepGII、WRL-68세포,72 h후상청중TRAIL표체량분별위32.75、24.53、34.02、32.89、17.08 μg/L.재MOI=1시,Ad-hTRAIL즉가인기종류세포명현조망,이재MOI=100시대정상세포WRL-68、MRC-5야몰유명현살상작용.결론선병독재체휴대인TRAIL기인재종류기인치료방면유비상엄활적응용전경.
