CAJ | 학술논문

通过检测转化生长因子-β1(TGF-β1)对脐血单个核细胞增殖周期及凋亡的作用,探讨其对造血进行负调控的机制.采用5'-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测TGF-β1对细胞DNA合成的影响;应用Western blot检测TGF-β1对G1期细胞周期蛋白cyclin A,cyclin D1,CDK2和CDK4表达的影响;用姬姆萨染色和流式细胞分析法检测TGF-β1对细胞凋亡的作用.结果表明:①培养细胞加入10%胎牛血清(FBS)和1,2及5 ng/ml的TGF-β1 12小时后,BrdU的OD值与对照(10%FBS)组相比有显著性差异(P＜0.01);继续培养24小时后,1 ng/ml TGF-β1组的BrdU检测OD值与10%FBS组相比无显著性差异(P＞0.05),而2 ng/ml和5 ng/ml TGF-β1组的OD值与10%FBS组相比差异有显著性(P＜0.05).②与对照组相比,2 ng/ml TGF-β1还可明显抑制cyclin A,cyclin D1,CDK2和CDK4的表达.③与2 ng/ml TGF-β1共培养12和24小时后,细胞出现凋亡特征性改变,凋亡率分别为14.42%和31.98%;而对照组未见明显形态变化,凋亡率分别为4.71%和5.76%.结论:TGF-β1可通过抑制造血细胞DNA的合成和G1期细胞周期蛋白的表达,从而阻止细胞进入S期,抑制细胞增殖.TGF-β1还可促进造血细胞凋亡,因而是一个重要的造血负性调控因子.
통과검측전화생장인자-β1(TGF-β1)대제혈단개핵세포증식주기급조망적작용,탐토기대조혈진행부조공적궤제.채용5'-추탈양뇨밀정핵감(BrdU)참입법검측TGF-β1대세포DNA합성적영향;응용Western blot검측TGF-β1대G1기세포주기단백cyclin A,cyclin D1,CDK2화CDK4표체적영향;용희모살염색화류식세포분석법검측TGF-β1대세포조망적작용.결과표명:①배양세포가입10%태우혈청(FBS)화1,2급5 ng/ml적TGF-β1 12소시후,BrdU적OD치여대조(10%FBS)조상비유현저성차이(P＜0.01);계속배양24소시후,1 ng/ml TGF-β1조적BrdU검측OD치여10%FBS조상비무현저성차이(P＞0.05),이2 ng/ml화5 ng/ml TGF-β1조적OD치여10%FBS조상비차이유현저성(P＜0.05).②여대조조상비,2 ng/ml TGF-β1환가명현억제cyclin A,cyclin D1,CDK2화CDK4적표체.③여2 ng/ml TGF-β1공배양12화24소시후,세포출현조망특정성개변,조망솔분별위14.42%화31.98%;이대조조미견명현형태변화,조망솔분별위4.71%화5.76%.결론:TGF-β1가통과억제조혈세포DNA적합성화G1기세포주기단백적표체,종이조지세포진입S기,억제세포증식.TGF-β1환가촉진조혈세포조망,인이시일개중요적조혈부성조공인자.