解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2005年
4期
342-344
,共3页
饶桂荣%粟宽源%陈文吟%余宙耀
饒桂榮%粟寬源%陳文吟%餘宙耀
요계영%속관원%진문음%여주요
抗HBsAg Fab抗体%亲和层析%离子交换-分子筛%纯化
抗HBsAg Fab抗體%親和層析%離子交換-分子篩%純化
항HBsAg Fab항체%친화층석%리자교환-분자사%순화
目的研究重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化条件.方法采用羊抗人Fab抗体亲和层析柱、14F7单克隆抗体亲和层析柱、离子交换-分子筛层析柱,分别纯化由酵母工程菌(GS115/Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并对3种纯化方法所得Fab抗体的纯度、收率、与HBsAg的结合活性进行比较.结果 3种纯化方法中,14F7单克隆抗体柱纯化的Fab抗体的纯度达98%左右,Fab抗体柱纯化的Fab抗体的纯度为95%,但这两种亲和柱的目的蛋白收率都不高,分别为35%、55%.而离子交换柱纯化的Fab抗体的纯度为93.8%,经分子筛柱进一步纯化后,可达98%以上,Fab抗体蛋白收率可达80%以上.经ELISA分析,3种方法纯化的Fab抗体均具有较高的HBsAg抗原结合力和特异性.结论通过对3种纯化方法的比较得出,离子交换-分子筛层析法是重组人抗HBsAg Fab抗体的最佳纯化方法,这为抗HBsAg Fab抗体的产业化生产和临床研究打下良好基础.
目的研究重組人抗HBsAg Fab抗體的純化條件.方法採用羊抗人Fab抗體親和層析柱、14F7單剋隆抗體親和層析柱、離子交換-分子篩層析柱,分彆純化由酵母工程菌(GS115/Fab)髮酵的重組人抗HBsAg Fab抗體,併對3種純化方法所得Fab抗體的純度、收率、與HBsAg的結閤活性進行比較.結果 3種純化方法中,14F7單剋隆抗體柱純化的Fab抗體的純度達98%左右,Fab抗體柱純化的Fab抗體的純度為95%,但這兩種親和柱的目的蛋白收率都不高,分彆為35%、55%.而離子交換柱純化的Fab抗體的純度為93.8%,經分子篩柱進一步純化後,可達98%以上,Fab抗體蛋白收率可達80%以上.經ELISA分析,3種方法純化的Fab抗體均具有較高的HBsAg抗原結閤力和特異性.結論通過對3種純化方法的比較得齣,離子交換-分子篩層析法是重組人抗HBsAg Fab抗體的最佳純化方法,這為抗HBsAg Fab抗體的產業化生產和臨床研究打下良好基礎.
목적연구중조인항HBsAg Fab항체적순화조건.방법채용양항인Fab항체친화층석주、14F7단극륭항체친화층석주、리자교환-분자사층석주,분별순화유효모공정균(GS115/Fab)발효적중조인항HBsAg Fab항체,병대3충순화방법소득Fab항체적순도、수솔、여HBsAg적결합활성진행비교.결과 3충순화방법중,14F7단극륭항체주순화적Fab항체적순도체98%좌우,Fab항체주순화적Fab항체적순도위95%,단저량충친화주적목적단백수솔도불고,분별위35%、55%.이리자교환주순화적Fab항체적순도위93.8%,경분자사주진일보순화후,가체98%이상,Fab항체단백수솔가체80%이상.경ELISA분석,3충방법순화적Fab항체균구유교고적HBsAg항원결합력화특이성.결론통과대3충순화방법적비교득출,리자교환-분자사층석법시중조인항HBsAg Fab항체적최가순화방법,저위항HBsAg Fab항체적산업화생산화림상연구타하량호기출.
