细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2007年
1期
147-152
,共6页
黄科%叶纨芝%余小林%向珣%卢钢%曹家树
黃科%葉紈芝%餘小林%嚮珣%盧鋼%曹傢樹
황과%협환지%여소림%향순%로강%조가수
芥蓝%遗传转化体系%正交旋转组合设计
芥藍%遺傳轉化體繫%正交鏇轉組閤設計
개람%유전전화체계%정교선전조합설계
采用正交旋转设计方法对影响芥蓝遗传转化体系的因素进行了优化研究,结果表明:影响芥蓝KanR苗率的最主要因素是Kan浓度,而预培养时间和共培养时间是芥蓝遗传转化的主要影响因素.最利于芥蓝遗传转化的操作程序为:将芥蓝无菌苗下胚轴在预培养基上预培养2天后,在LBA4404菌液中感染8 min,置于共培养培养基上培养2天,随后把外植体转入含Kan的选择分化培养基上诱导不定芽,28天转瓶一次,当抗性幼苗长至2～3 cm时,齐愈伤组织处切下幼苗在生根培养基上诱导不定根,25天左右后等不定根长成即可开瓶炼苗,继而移栽至营养土中,正常管理至开花结果;经PCR、Southern印迹检测,证明CYP86MF基因已经整合至转基因植株染色体中.
採用正交鏇轉設計方法對影響芥藍遺傳轉化體繫的因素進行瞭優化研究,結果錶明:影響芥藍KanR苗率的最主要因素是Kan濃度,而預培養時間和共培養時間是芥藍遺傳轉化的主要影響因素.最利于芥藍遺傳轉化的操作程序為:將芥藍無菌苗下胚軸在預培養基上預培養2天後,在LBA4404菌液中感染8 min,置于共培養培養基上培養2天,隨後把外植體轉入含Kan的選擇分化培養基上誘導不定芽,28天轉瓶一次,噹抗性幼苗長至2～3 cm時,齊愈傷組織處切下幼苗在生根培養基上誘導不定根,25天左右後等不定根長成即可開瓶煉苗,繼而移栽至營養土中,正常管理至開花結果;經PCR、Southern印跡檢測,證明CYP86MF基因已經整閤至轉基因植株染色體中.
채용정교선전설계방법대영향개람유전전화체계적인소진행료우화연구,결과표명:영향개람KanR묘솔적최주요인소시Kan농도,이예배양시간화공배양시간시개람유전전화적주요영향인소.최리우개람유전전화적조작정서위:장개람무균묘하배축재예배양기상예배양2천후,재LBA4404균액중감염8 min,치우공배양배양기상배양2천,수후파외식체전입함Kan적선택분화배양기상유도불정아,28천전병일차,당항성유묘장지2～3 cm시,제유상조직처절하유묘재생근배양기상유도불정근,25천좌우후등불정근장성즉가개병련묘,계이이재지영양토중,정상관리지개화결과;경PCR、Southern인적검측,증명CYP86MF기인이경정합지전기인식주염색체중.
