细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
5期
453-456
,共4页
马淑花%甘愉%张毅%朱明洁%胡晶莹%杨瑶琴%赵新泰
馬淑花%甘愉%張毅%硃明潔%鬍晶瑩%楊瑤琴%趙新泰
마숙화%감유%장의%주명길%호정형%양요금%조신태
整合素β3%单克隆抗体%肿瘤治疗
整閤素β3%單剋隆抗體%腫瘤治療
정합소β3%단극륭항체%종류치료
目的:制备抗人整合素β3亚基的单克隆抗体(mAb),研究其对肿瘤治疗的作用.方法:用RT-PCR方法扩增人β3胞膜外基因,将其克隆至原核表达载体pQE30中,获得含β3胞膜外基因的高效表达载体pQE30-β3,将其转化大肠杆菌M15,通过诱导表达及纯化,获得β3蛋白.将此蛋白免疫BALB/c小鼠,应用B淋巴细胞杂交瘤技术制备抗β3亚基mAb,Western blot鉴定mAb的特异性.通过小鼠体内抑制黑色素瘤生长实验筛选出具有抑制肿瘤生长作用的mAb.进一步用MTT法及流式细胞术观察该mAb体外抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及诱导其凋亡的作用.结果:扩增获得了β3胞膜外基因,构建了β3蛋白的原核表达载体,表达纯化了β3蛋白,成功制备了8株mAb,Western blot证明了其特异性.经过体内抑瘤实验筛选出一株具有显著抑制肿瘤生长的mAb 4F12.该mAb可抑制HUVEC细胞增殖并诱导其凋亡.结论:成功表达了β3蛋白,并制备了有活性的mAb,抗体具有抑制肿瘤生长的作用,这可能是通过抑制血管内皮细胞的增殖和诱发凋亡实现的.
目的:製備抗人整閤素β3亞基的單剋隆抗體(mAb),研究其對腫瘤治療的作用.方法:用RT-PCR方法擴增人β3胞膜外基因,將其剋隆至原覈錶達載體pQE30中,穫得含β3胞膜外基因的高效錶達載體pQE30-β3,將其轉化大腸桿菌M15,通過誘導錶達及純化,穫得β3蛋白.將此蛋白免疫BALB/c小鼠,應用B淋巴細胞雜交瘤技術製備抗β3亞基mAb,Western blot鑒定mAb的特異性.通過小鼠體內抑製黑色素瘤生長實驗篩選齣具有抑製腫瘤生長作用的mAb.進一步用MTT法及流式細胞術觀察該mAb體外抑製人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)增殖及誘導其凋亡的作用.結果:擴增穫得瞭β3胞膜外基因,構建瞭β3蛋白的原覈錶達載體,錶達純化瞭β3蛋白,成功製備瞭8株mAb,Western blot證明瞭其特異性.經過體內抑瘤實驗篩選齣一株具有顯著抑製腫瘤生長的mAb 4F12.該mAb可抑製HUVEC細胞增殖併誘導其凋亡.結論:成功錶達瞭β3蛋白,併製備瞭有活性的mAb,抗體具有抑製腫瘤生長的作用,這可能是通過抑製血管內皮細胞的增殖和誘髮凋亡實現的.
목적:제비항인정합소β3아기적단극륭항체(mAb),연구기대종류치료적작용.방법:용RT-PCR방법확증인β3포막외기인,장기극륭지원핵표체재체pQE30중,획득함β3포막외기인적고효표체재체pQE30-β3,장기전화대장간균M15,통과유도표체급순화,획득β3단백.장차단백면역BALB/c소서,응용B림파세포잡교류기술제비항β3아기mAb,Western blot감정mAb적특이성.통과소서체내억제흑색소류생장실험사선출구유억제종류생장작용적mAb.진일보용MTT법급류식세포술관찰해mAb체외억제인제정맥내피세포(HUVEC)증식급유도기조망적작용.결과:확증획득료β3포막외기인,구건료β3단백적원핵표체재체,표체순화료β3단백,성공제비료8주mAb,Western blot증명료기특이성.경과체내억류실험사선출일주구유현저억제종류생장적mAb 4F12.해mAb가억제HUVEC세포증식병유도기조망.결론:성공표체료β3단백,병제비료유활성적mAb,항체구유억제종류생장적작용,저가능시통과억제혈관내피세포적증식화유발조망실현적.
