中国肿瘤临床
中國腫瘤臨床
중국종류림상
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY
2008年
3期
158-161
,共4页
秦宏敏%韩会峰%沙广钊%刘林%彭易根%任天成
秦宏敏%韓會峰%沙廣釗%劉林%彭易根%任天成
진굉민%한회봉%사엄쇠%류림%팽역근%임천성
siRNA(Sox9)%RNA干扰%Sox9蛋白和mRNA表达%细胞生长曲线%细胞凋亡
siRNA(Sox9)%RNA榦擾%Sox9蛋白和mRNA錶達%細胞生長麯線%細胞凋亡
siRNA(Sox9)%RNA간우%Sox9단백화mRNA표체%세포생장곡선%세포조망
目的:利用小干扰阻断目的基因的原理将构建的目的基因Sox9的pSilencer3,1-H1 neo siRNA(small interfering RNA)表达质粒转染人体软骨内瘤细胞HTB-94,观察目的基因被阻断后肿瘤细胞目的基因的表达、肿瘤细胞生长和凋亡所受到的影响.方法:设计并合成Sox9(siRNA),鉴定后将其转染HTB-94肿瘤细胞,观察肿瘤细胞的Sox9基因的mRNA和蛋白表达的变化.以及被转染肿瘤细胞的生长曲线和肿瘤细胞凋亡的情况.结果:Sox9(siRNA)的插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致.被转染的HTB-94 Sox9基因的mRNA的表达量下降了35.4%,蛋白的表达量下降了31.3%;Sox9(siRNA)转染HTB-94细胞24h和96h的光吸收值分别为0.146+0.037和0.412±0.036,而正常对照细胞组两个同样时间段的光吸收值分别为0.152±0.0367和0.607±0.029.其中细胞生长增殖速度的差异为32.0%,肿瘤细胞的生长明显受到抑制;Sox9(siRNA)转染HTB-94细胞的干扰组细胞凋亡率为39.2%;而未经干扰的HTB-94肿瘤细胞的细胞凋亡率为0.1%.结论:经过设计合成的Sox9(siRNA)表达质粒可以稳定转染人体软骨肉瘤细胞HTB-94肿瘤细胞,被Sox9(siRNA)表达质粒转染的人体软骨肉瘤细胞HTB-94肿瘤细胞Sox9基因的mRNA和蛋白的表达都受到抑制,同时肿瘤细胞的生长繁殖也受到明显抑制.肿瘤细胞的凋亡明显增加.
目的:利用小榦擾阻斷目的基因的原理將構建的目的基因Sox9的pSilencer3,1-H1 neo siRNA(small interfering RNA)錶達質粒轉染人體軟骨內瘤細胞HTB-94,觀察目的基因被阻斷後腫瘤細胞目的基因的錶達、腫瘤細胞生長和凋亡所受到的影響.方法:設計併閤成Sox9(siRNA),鑒定後將其轉染HTB-94腫瘤細胞,觀察腫瘤細胞的Sox9基因的mRNA和蛋白錶達的變化.以及被轉染腫瘤細胞的生長麯線和腫瘤細胞凋亡的情況.結果:Sox9(siRNA)的插入片段測序結果與閤成的siRNA結果一緻.被轉染的HTB-94 Sox9基因的mRNA的錶達量下降瞭35.4%,蛋白的錶達量下降瞭31.3%;Sox9(siRNA)轉染HTB-94細胞24h和96h的光吸收值分彆為0.146+0.037和0.412±0.036,而正常對照細胞組兩箇同樣時間段的光吸收值分彆為0.152±0.0367和0.607±0.029.其中細胞生長增殖速度的差異為32.0%,腫瘤細胞的生長明顯受到抑製;Sox9(siRNA)轉染HTB-94細胞的榦擾組細胞凋亡率為39.2%;而未經榦擾的HTB-94腫瘤細胞的細胞凋亡率為0.1%.結論:經過設計閤成的Sox9(siRNA)錶達質粒可以穩定轉染人體軟骨肉瘤細胞HTB-94腫瘤細胞,被Sox9(siRNA)錶達質粒轉染的人體軟骨肉瘤細胞HTB-94腫瘤細胞Sox9基因的mRNA和蛋白的錶達都受到抑製,同時腫瘤細胞的生長繁殖也受到明顯抑製.腫瘤細胞的凋亡明顯增加.
목적:이용소간우조단목적기인적원리장구건적목적기인Sox9적pSilencer3,1-H1 neo siRNA(small interfering RNA)표체질립전염인체연골내류세포HTB-94,관찰목적기인피조단후종류세포목적기인적표체、종류세포생장화조망소수도적영향.방법:설계병합성Sox9(siRNA),감정후장기전염HTB-94종류세포,관찰종류세포적Sox9기인적mRNA화단백표체적변화.이급피전염종류세포적생장곡선화종류세포조망적정황.결과:Sox9(siRNA)적삽입편단측서결과여합성적siRNA결과일치.피전염적HTB-94 Sox9기인적mRNA적표체량하강료35.4%,단백적표체량하강료31.3%;Sox9(siRNA)전염HTB-94세포24h화96h적광흡수치분별위0.146+0.037화0.412±0.036,이정상대조세포조량개동양시간단적광흡수치분별위0.152±0.0367화0.607±0.029.기중세포생장증식속도적차이위32.0%,종류세포적생장명현수도억제;Sox9(siRNA)전염HTB-94세포적간우조세포조망솔위39.2%;이미경간우적HTB-94종류세포적세포조망솔위0.1%.결론:경과설계합성적Sox9(siRNA)표체질립가이은정전염인체연골육류세포HTB-94종류세포,피Sox9(siRNA)표체질립전염적인체연골육류세포HTB-94종류세포Sox9기인적mRNA화단백적표체도수도억제,동시종류세포적생장번식야수도명현억제.종류세포적조망명현증가.
