中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2009年
4期
1026-1031
,共6页
吕媛婧%苏晓瑜%阮铮%奚晓东
呂媛婧%囌曉瑜%阮錚%奚曉東
려원청%소효유%원쟁%해효동
显性阴性%整合素%αⅡbβ3%信号转导
顯性陰性%整閤素%αⅡbβ3%信號轉導
현성음성%정합소%αⅡbβ3%신호전도
本研究目的是明确整合素β3亚单位胞浆段序列在整合素αⅡbβ3介导的信号转导中的重要作用,并进一步了解在无αⅡb亚单位存在的条件下其对信号转导及特异性的影响程度.运用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素B3胞浆段组成的融合蛋白(Tac/β3),使其在表达GPⅠbⅨ、整合素αⅡbβ3的CHO细胞株(ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO细胞株)中稳定表达(即得到ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762细胞),并进行多项试验,包括在固相纤维蛋白原的伸展、稳定黏附试验、细胞纤维蛋白凝块回缩功能试验以及游离纤维蛋白原结合试验(分别代表了外向内及内向外信号转导事件).结果表明,在稳定表达有Tac/133的ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762细胞中αⅡbβ3介导的双向信号转导严重受到抑制.结论:Tac/β3可以在ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762细胞中发挥显著有效的显性阴性作用,并且证实整合素B3亚单位胞浆段的单独存在即可影响由αⅡbβ3介导的双向信号转导.
本研究目的是明確整閤素β3亞單位胞漿段序列在整閤素αⅡbβ3介導的信號轉導中的重要作用,併進一步瞭解在無αⅡb亞單位存在的條件下其對信號轉導及特異性的影響程度.運用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)與整閤素B3胞漿段組成的融閤蛋白(Tac/β3),使其在錶達GPⅠbⅨ、整閤素αⅡbβ3的CHO細胞株(ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO細胞株)中穩定錶達(即得到ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762細胞),併進行多項試驗,包括在固相纖維蛋白原的伸展、穩定黏附試驗、細胞纖維蛋白凝塊迴縮功能試驗以及遊離纖維蛋白原結閤試驗(分彆代錶瞭外嚮內及內嚮外信號轉導事件).結果錶明,在穩定錶達有Tac/133的ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762細胞中αⅡbβ3介導的雙嚮信號轉導嚴重受到抑製.結論:Tac/β3可以在ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762細胞中髮揮顯著有效的顯性陰性作用,併且證實整閤素B3亞單位胞漿段的單獨存在即可影響由αⅡbβ3介導的雙嚮信號轉導.
본연구목적시명학정합소β3아단위포장단서렬재정합소αⅡbβ3개도적신호전도중적중요작용,병진일보료해재무αⅡb아단위존재적조건하기대신호전도급특이성적영향정도.운용유IL-2R포외단화과막단(Tac)여정합소B3포장단조성적융합단백(Tac/β3),사기재표체GPⅠbⅨ、정합소αⅡbβ3적CHO세포주(ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO세포주)중은정표체(즉득도ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762세포),병진행다항시험,포괄재고상섬유단백원적신전、은정점부시험、세포섬유단백응괴회축공능시험이급유리섬유단백원결합시험(분별대표료외향내급내향외신호전도사건).결과표명,재은정표체유Tac/133적ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762세포중αⅡbβ3개도적쌍향신호전도엄중수도억제.결론:Tac/β3가이재ⅠbⅨ/ⅡbⅢa-CHO/Tac-762세포중발휘현저유효적현성음성작용,병차증실정합소B3아단위포장단적단독존재즉가영향유αⅡbβ3개도적쌍향신호전도.