中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
7期
1382-1388
,共7页
王大鹏%林洪丽%沈楠%董毳%孙艳玲%谢华%于长青%王楠%单路娟
王大鵬%林洪麗%瀋楠%董毳%孫豔玲%謝華%于長青%王楠%單路娟
왕대붕%림홍려%침남%동취%손염령%사화%우장청%왕남%단로연
核心岩藻糖基化%上皮细胞间充质转分化%核心岩藻糖基转移酶%HK-2细胞
覈心巖藻糖基化%上皮細胞間充質轉分化%覈心巖藻糖基轉移酶%HK-2細胞
핵심암조당기화%상피세포간충질전분화%핵심암조당기전이매%HK-2세포
目的:探讨阻抑核心岩藻糖基化修饰对肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)过程的影响.方法:利用转化生长因子β1(TGF-β1)建立肾小管上皮HK-2细胞EMT的模型,应用RNAi技术沉默HK-2细胞的α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,光镜下观察FUT8基因沉默后细胞形态变化,免疫印迹及免疫细胞化学方法测定细胞表型标记物蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)的表达变化,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果:TGF-β1孵育48 h后,HK-2细胞失去原有的上皮细胞形态,呈现纤维细胞形态,纤维细胞表型标记蛋白α-SMA、FSP-1及N-cadherin表达明显升高,而上皮细胞表型标记蛋白E-cadherin表达明显下降,同时伴有FUT8基因表达上调,细胞凋亡增加,而提前转染FUT8 siRNA能明显减弱上述这些反应.结论:FUT8催化的核心岩藻糖基化修饰参与HK-2细胞的EMT过程;阻断核心岩藻糖基化修饰,能有效阻断肾小管上皮细胞的EMT过程.
目的:探討阻抑覈心巖藻糖基化脩飾對腎小管上皮細胞間充質轉化(EMT)過程的影響.方法:利用轉化生長因子β1(TGF-β1)建立腎小管上皮HK-2細胞EMT的模型,應用RNAi技術沉默HK-2細胞的α-1,6-巖藻糖基轉移酶(FUT8)基因錶達,光鏡下觀察FUT8基因沉默後細胞形態變化,免疫印跡及免疫細胞化學方法測定細胞錶型標記物蛋白E-鈣黏蛋白(E-cadherin)、N-鈣黏蛋白(N-cadherin)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和成纖維細胞特異性蛋白-1(FSP-1)的錶達變化,流式細胞儀測定細胞凋亡.結果:TGF-β1孵育48 h後,HK-2細胞失去原有的上皮細胞形態,呈現纖維細胞形態,纖維細胞錶型標記蛋白α-SMA、FSP-1及N-cadherin錶達明顯升高,而上皮細胞錶型標記蛋白E-cadherin錶達明顯下降,同時伴有FUT8基因錶達上調,細胞凋亡增加,而提前轉染FUT8 siRNA能明顯減弱上述這些反應.結論:FUT8催化的覈心巖藻糖基化脩飾參與HK-2細胞的EMT過程;阻斷覈心巖藻糖基化脩飾,能有效阻斷腎小管上皮細胞的EMT過程.
목적:탐토조억핵심암조당기화수식대신소관상피세포간충질전화(EMT)과정적영향.방법:이용전화생장인자β1(TGF-β1)건립신소관상피HK-2세포EMT적모형,응용RNAi기술침묵HK-2세포적α-1,6-암조당기전이매(FUT8)기인표체,광경하관찰FUT8기인침묵후세포형태변화,면역인적급면역세포화학방법측정세포표형표기물단백E-개점단백(E-cadherin)、N-개점단백(N-cadherin)、α-평활기기동단백(α-SMA)화성섬유세포특이성단백-1(FSP-1)적표체변화,류식세포의측정세포조망.결과:TGF-β1부육48 h후,HK-2세포실거원유적상피세포형태,정현섬유세포형태,섬유세포표형표기단백α-SMA、FSP-1급N-cadherin표체명현승고,이상피세포표형표기단백E-cadherin표체명현하강,동시반유FUT8기인표체상조,세포조망증가,이제전전염FUT8 siRNA능명현감약상술저사반응.결론:FUT8최화적핵심암조당기화수식삼여HK-2세포적EMT과정;조단핵심암조당기화수식,능유효조단신소관상피세포적EMT과정.
