神经损伤与功能重建
神經損傷與功能重建
신경손상여공능중건
NEURAL INJURY AND FUNCTIONAL RECONSTRUCTION
2011年
4期
235-240
,共6页
谢三平%陈吉相%李慧%徐婧%黄园园
謝三平%陳吉相%李慧%徐婧%黃園園
사삼평%진길상%리혜%서청%황완완
谷氨酸脱羧酶67%真核表达载体%转染%骨髓基质细胞
穀氨痠脫羧酶67%真覈錶達載體%轉染%骨髓基質細胞
곡안산탈최매67%진핵표체재체%전염%골수기질세포
目的:构建携带人类谷氨酸脱羧酶67(GAD67)基因的真核表达载体pDC316-CMV-EGFP-GAD67,并转染大鼠骨髓基质细胞(BMSCs).方法:利用基因重组技术,构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体;利用脂质体将其转染通过贴壁方法分离培养出来的BMSCs,荧光显微镜下观察并经流式细胞仪检测其转染效率,免疫组化检测GAD67蛋白在BMSCs中的表达.结果:成功构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体,转染BMSCs后荧光显微镜下观察可见绿色荧光细胞,流式细胞仪检测转染后48 h的转染效率为37.3%,免疫组化检测转染后48 h,BMSCs内GAD67蛋白呈阳性表达.结论:构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体并成功转染BMSCs.
目的:構建攜帶人類穀氨痠脫羧酶67(GAD67)基因的真覈錶達載體pDC316-CMV-EGFP-GAD67,併轉染大鼠骨髓基質細胞(BMSCs).方法:利用基因重組技術,構建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真覈錶達載體;利用脂質體將其轉染通過貼壁方法分離培養齣來的BMSCs,熒光顯微鏡下觀察併經流式細胞儀檢測其轉染效率,免疫組化檢測GAD67蛋白在BMSCs中的錶達.結果:成功構建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真覈錶達載體,轉染BMSCs後熒光顯微鏡下觀察可見綠色熒光細胞,流式細胞儀檢測轉染後48 h的轉染效率為37.3%,免疫組化檢測轉染後48 h,BMSCs內GAD67蛋白呈暘性錶達.結論:構建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真覈錶達載體併成功轉染BMSCs.
목적:구건휴대인류곡안산탈최매67(GAD67)기인적진핵표체재체pDC316-CMV-EGFP-GAD67,병전염대서골수기질세포(BMSCs).방법:이용기인중조기술,구건pDC316-CMV-EGFP-GAD67진핵표체재체;이용지질체장기전염통과첩벽방법분리배양출래적BMSCs,형광현미경하관찰병경류식세포의검측기전염효솔,면역조화검측GAD67단백재BMSCs중적표체.결과:성공구건pDC316-CMV-EGFP-GAD67진핵표체재체,전염BMSCs후형광현미경하관찰가견록색형광세포,류식세포의검측전염후48 h적전염효솔위37.3%,면역조화검측전염후48 h,BMSCs내GAD67단백정양성표체.결론:구건pDC316-CMV-EGFP-GAD67진핵표체재체병성공전염BMSCs.