解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2012年
3期
247-250,254
,共5页
刘嘉晖%赵宇%欧阳嶷%何志义
劉嘉暉%趙宇%歐暘嶷%何誌義
류가휘%조우%구양억%하지의
脑源性神经营养因子%骨髓基质细胞%转染%SD大鼠
腦源性神經營養因子%骨髓基質細胞%轉染%SD大鼠
뇌원성신경영양인자%골수기질세포%전염%SD대서
目的 研究基因真核表达载体PcDNA3.1-BDNF的构建及其在骨髓基质细胞的转染和表达情况.方法 以挪威大鼠BDNFcDNA为模板,PCR扩增BDNF全长编码基因,亚克隆至PcDNA3.1表达载体.将构建的重组质粒测序并通过脂质体转染到骨髓基质细胞中,RT-PCR鉴定BDNF基因的表达,Western blot检测BDNF蛋白的表达.结果 BDNF基因成功克隆到表达载体PcDNA3.1中,酶切鉴定片段为800bp,Western blot检测到BDNF在骨髓基质细胞呈阳性表达.结论 真核表达载体构建成功,BDNF转染BMSCs后可稳定、高效表达.
目的 研究基因真覈錶達載體PcDNA3.1-BDNF的構建及其在骨髓基質細胞的轉染和錶達情況.方法 以挪威大鼠BDNFcDNA為模闆,PCR擴增BDNF全長編碼基因,亞剋隆至PcDNA3.1錶達載體.將構建的重組質粒測序併通過脂質體轉染到骨髓基質細胞中,RT-PCR鑒定BDNF基因的錶達,Western blot檢測BDNF蛋白的錶達.結果 BDNF基因成功剋隆到錶達載體PcDNA3.1中,酶切鑒定片段為800bp,Western blot檢測到BDNF在骨髓基質細胞呈暘性錶達.結論 真覈錶達載體構建成功,BDNF轉染BMSCs後可穩定、高效錶達.
목적 연구기인진핵표체재체PcDNA3.1-BDNF적구건급기재골수기질세포적전염화표체정황.방법 이나위대서BDNFcDNA위모판,PCR확증BDNF전장편마기인,아극륭지PcDNA3.1표체재체.장구건적중조질립측서병통과지질체전염도골수기질세포중,RT-PCR감정BDNF기인적표체,Western blot검측BDNF단백적표체.결과 BDNF기인성공극륭도표체재체PcDNA3.1중,매절감정편단위800bp,Western blot검측도BDNF재골수기질세포정양성표체.결론 진핵표체재체구건성공,BDNF전염BMSCs후가은정、고효표체.
