实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2010年
10期
760-763
,共4页
顾小海%顾绍庆%陈慧娟%李继安%叶亮英%郑意
顧小海%顧紹慶%陳慧娟%李繼安%葉亮英%鄭意
고소해%고소경%진혜연%리계안%협량영%정의
低分子肝素%人巨细胞病毒%细胞病变效应%半数抑制浓度
低分子肝素%人巨細胞病毒%細胞病變效應%半數抑製濃度
저분자간소%인거세포병독%세포병변효응%반수억제농도
目的 探讨低分子肝素(LMWH)体外对人巨细胞病毒(HCMV)的抑制作用.方法 根据病毒复制周期,设计3种抗病毒作用方式观察LMWH对HCMV的抑制作用.并设更昔洛韦(GCV)为阳性对照药.1.增殖抑制法:将人胚成纤维细胞(HF细胞)以病毒悬液吸附1.5 h后,弃去病毒液后加入含不同浓度LMWH.2.感染阻断法:HF细胞加不同浓度LMWH培养1.5 h,再加入100倍半数组织培养感染量(100TCID50)的病毒感染细胞后用细胞维持液培养.3.直接杀灭法:LMWH药物与病毒共同置于培养箱中1.5 h,再感染HF细胞,1.5 h后更换成细胞维持液培养.各实验组细胞置37 ℃、50 mL·L-1二氧化碳恒温箱内培养,逐日在显微镜下观察细胞病变结果.待病毒对照组出现明显病变时,采用四甲基偶氮唑盐(MTF)比色法测定A490值.计算细胞存活率和病毒抑制率,并使用Probit回归法计算2种药物对HCMV的半数抑制浓度(IC50).结果 MTT法测定正常细胞对照组及病毒对照组A490值分别为0.386±0.024和0.045±0.002.在增殖抑制法中,GCV的IC50、治疗指数(TI)分别为352.6 mg·L-1和47.8.在感染阻断法和直接杀灭法中,LMWH的IC50、TI分别为2 016.9 mg·L-1、1.12和555.5 mg·L-1、4.07.结论 LMWH具有抗HCMV作用,但作用机制与GCV不同,其通过感染阻断和直接杀灭机制发挥抗HCMV的作用,具有较明显的量效关系.
目的 探討低分子肝素(LMWH)體外對人巨細胞病毒(HCMV)的抑製作用.方法 根據病毒複製週期,設計3種抗病毒作用方式觀察LMWH對HCMV的抑製作用.併設更昔洛韋(GCV)為暘性對照藥.1.增殖抑製法:將人胚成纖維細胞(HF細胞)以病毒懸液吸附1.5 h後,棄去病毒液後加入含不同濃度LMWH.2.感染阻斷法:HF細胞加不同濃度LMWH培養1.5 h,再加入100倍半數組織培養感染量(100TCID50)的病毒感染細胞後用細胞維持液培養.3.直接殺滅法:LMWH藥物與病毒共同置于培養箱中1.5 h,再感染HF細胞,1.5 h後更換成細胞維持液培養.各實驗組細胞置37 ℃、50 mL·L-1二氧化碳恆溫箱內培養,逐日在顯微鏡下觀察細胞病變結果.待病毒對照組齣現明顯病變時,採用四甲基偶氮唑鹽(MTF)比色法測定A490值.計算細胞存活率和病毒抑製率,併使用Probit迴歸法計算2種藥物對HCMV的半數抑製濃度(IC50).結果 MTT法測定正常細胞對照組及病毒對照組A490值分彆為0.386±0.024和0.045±0.002.在增殖抑製法中,GCV的IC50、治療指數(TI)分彆為352.6 mg·L-1和47.8.在感染阻斷法和直接殺滅法中,LMWH的IC50、TI分彆為2 016.9 mg·L-1、1.12和555.5 mg·L-1、4.07.結論 LMWH具有抗HCMV作用,但作用機製與GCV不同,其通過感染阻斷和直接殺滅機製髮揮抗HCMV的作用,具有較明顯的量效關繫.
목적 탐토저분자간소(LMWH)체외대인거세포병독(HCMV)적억제작용.방법 근거병독복제주기,설계3충항병독작용방식관찰LMWH대HCMV적억제작용.병설경석락위(GCV)위양성대조약.1.증식억제법:장인배성섬유세포(HF세포)이병독현액흡부1.5 h후,기거병독액후가입함불동농도LMWH.2.감염조단법:HF세포가불동농도LMWH배양1.5 h,재가입100배반수조직배양감염량(100TCID50)적병독감염세포후용세포유지액배양.3.직접살멸법:LMWH약물여병독공동치우배양상중1.5 h,재감염HF세포,1.5 h후경환성세포유지액배양.각실험조세포치37 ℃、50 mL·L-1이양화탄항온상내배양,축일재현미경하관찰세포병변결과.대병독대조조출현명현병변시,채용사갑기우담서염(MTF)비색법측정A490치.계산세포존활솔화병독억제솔,병사용Probit회귀법계산2충약물대HCMV적반수억제농도(IC50).결과 MTT법측정정상세포대조조급병독대조조A490치분별위0.386±0.024화0.045±0.002.재증식억제법중,GCV적IC50、치료지수(TI)분별위352.6 mg·L-1화47.8.재감염조단법화직접살멸법중,LMWH적IC50、TI분별위2 016.9 mg·L-1、1.12화555.5 mg·L-1、4.07.결론 LMWH구유항HCMV작용,단작용궤제여GCV불동,기통과감염조단화직접살멸궤제발휘항HCMV적작용,구유교명현적량효관계.
