中国美容医学
中國美容醫學
중국미용의학
CHINESE JOURNAL OF AESTHETIC MEDICINE
2006年
5期
521-524,中插3
,共5页
唐辉%梁晚益%刘旭盛%李金玺%黄跃生
唐輝%樑晚益%劉旭盛%李金璽%黃躍生
당휘%량만익%류욱성%리금새%황약생
Smad3%COL1A2基序%不稳定增强型绿色荧光蛋白%圈套
Smad3%COL1A2基序%不穩定增彊型綠色熒光蛋白%圈套
Smad3%COL1A2기서%불은정증강형록색형광단백%권투
目的:构建Smad3反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白(d2EGFP)报告系统,作为抗瘢痕增生药物高通量筛选体系.方法:分别以EGFP、d2EGFP为报告基因,neor为筛选基因,构建以4×成纤维细胞α 2 Ⅰ型前胶原(COL1A2)基序为增强子、SV40为启动子的报告基因载体p4COL1A2-EGFP和p4COL1A2-d2EGFP,并分别稳定转染NIH3T3细胞,获得Smad3反应性报告细胞株NIH3T3-d2EGFP和NIH3T3-EGFP.分别向两种细胞株中加入TGF-β 1,比较不同时相点d2EGFP和EGFP的表达.应用Smad3"圈套"寡核苷酸(TFD)转染NIH3T3-d2EGFP,加入TGF-β 1,观察TFD对TGF-β 1诱导d2EGFP表达的拮抗作用.结果:NIH3T3-d2EGFP是较理想的Smad3反应性报告细胞株,Smad3 TFD对TGF-β 1诱导调控d2EGFP的表达具有明显的拮抗作用.结论:Smad3反应性d2EGFP报告系统可特异、灵敏、动态地反映和监测Smad3的活性变化.
目的:構建Smad3反應性不穩定增彊型綠色熒光蛋白(d2EGFP)報告繫統,作為抗瘢痕增生藥物高通量篩選體繫.方法:分彆以EGFP、d2EGFP為報告基因,neor為篩選基因,構建以4×成纖維細胞α 2 Ⅰ型前膠原(COL1A2)基序為增彊子、SV40為啟動子的報告基因載體p4COL1A2-EGFP和p4COL1A2-d2EGFP,併分彆穩定轉染NIH3T3細胞,穫得Smad3反應性報告細胞株NIH3T3-d2EGFP和NIH3T3-EGFP.分彆嚮兩種細胞株中加入TGF-β 1,比較不同時相點d2EGFP和EGFP的錶達.應用Smad3"圈套"寡覈苷痠(TFD)轉染NIH3T3-d2EGFP,加入TGF-β 1,觀察TFD對TGF-β 1誘導d2EGFP錶達的拮抗作用.結果:NIH3T3-d2EGFP是較理想的Smad3反應性報告細胞株,Smad3 TFD對TGF-β 1誘導調控d2EGFP的錶達具有明顯的拮抗作用.結論:Smad3反應性d2EGFP報告繫統可特異、靈敏、動態地反映和鑑測Smad3的活性變化.
목적:구건Smad3반응성불은정증강형록색형광단백(d2EGFP)보고계통,작위항반흔증생약물고통량사선체계.방법:분별이EGFP、d2EGFP위보고기인,neor위사선기인,구건이4×성섬유세포α 2 Ⅰ형전효원(COL1A2)기서위증강자、SV40위계동자적보고기인재체p4COL1A2-EGFP화p4COL1A2-d2EGFP,병분별은정전염NIH3T3세포,획득Smad3반응성보고세포주NIH3T3-d2EGFP화NIH3T3-EGFP.분별향량충세포주중가입TGF-β 1,비교불동시상점d2EGFP화EGFP적표체.응용Smad3"권투"과핵감산(TFD)전염NIH3T3-d2EGFP,가입TGF-β 1,관찰TFD대TGF-β 1유도d2EGFP표체적길항작용.결과:NIH3T3-d2EGFP시교이상적Smad3반응성보고세포주,Smad3 TFD대TGF-β 1유도조공d2EGFP적표체구유명현적길항작용.결론:Smad3반응성d2EGFP보고계통가특이、령민、동태지반영화감측Smad3적활성변화.
