西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2007年
3期
1-6
,共6页
COL1A1%GC含量丰富%基因克隆
COL1A1%GC含量豐富%基因剋隆
COL1A1%GC함량봉부%기인극륭
鉴于做转基因牛羊乳腺生物反应器的需要,根据GenBank中所公布的人Ⅰ型原胶原蛋白基因序列设计引物,利用健康人的胎盘中提取的基因组DNA为模板,通过优化的长距离PCR,成功地克隆出GC含量丰富的人Ⅰ型原胶原基因组DNA片段,序列测定与分析的结果显示中国人Ⅰ型原胶原蛋白基因组DNA片段与GenBank中所公布出来的序列所对应的部分有99.5%的同源性,其中外显子部分与GenBank中的对应部分完全一致;而在内含子中,本研究克隆到的基因与GenBank中公布出来的序列有不少差异,尤其表现在内含子1和2中,其中内含子2要比GenBank中公布的基因内含子2多出14个碱基,这14个碱基具体有什么作用尚需要进一步阐明,内含子间的差异凸显了东西方人种之间基因序列的多态性.
鑒于做轉基因牛羊乳腺生物反應器的需要,根據GenBank中所公佈的人Ⅰ型原膠原蛋白基因序列設計引物,利用健康人的胎盤中提取的基因組DNA為模闆,通過優化的長距離PCR,成功地剋隆齣GC含量豐富的人Ⅰ型原膠原基因組DNA片段,序列測定與分析的結果顯示中國人Ⅰ型原膠原蛋白基因組DNA片段與GenBank中所公佈齣來的序列所對應的部分有99.5%的同源性,其中外顯子部分與GenBank中的對應部分完全一緻;而在內含子中,本研究剋隆到的基因與GenBank中公佈齣來的序列有不少差異,尤其錶現在內含子1和2中,其中內含子2要比GenBank中公佈的基因內含子2多齣14箇堿基,這14箇堿基具體有什麽作用尚需要進一步闡明,內含子間的差異凸顯瞭東西方人種之間基因序列的多態性.
감우주전기인우양유선생물반응기적수요,근거GenBank중소공포적인Ⅰ형원효원단백기인서렬설계인물,이용건강인적태반중제취적기인조DNA위모판,통과우화적장거리PCR,성공지극륭출GC함량봉부적인Ⅰ형원효원기인조DNA편단,서렬측정여분석적결과현시중국인Ⅰ형원효원단백기인조DNA편단여GenBank중소공포출래적서렬소대응적부분유99.5%적동원성,기중외현자부분여GenBank중적대응부분완전일치;이재내함자중,본연구극륭도적기인여GenBank중공포출래적서렬유불소차이,우기표현재내함자1화2중,기중내함자2요비GenBank중공포적기인내함자2다출14개감기,저14개감기구체유십요작용상수요진일보천명,내함자간적차이철현료동서방인충지간기인서렬적다태성.