CAJ | 학술논문

背景:细胞受刺激后即刻早期基因在细胞核内快速表达,其编码的核蛋白作为反式作用因子,通过激活某些基因的转录而调控细胞的增殖、分化等生物学行为.目的:观察电磁场刺激对大鼠骨髓间充质干细胞c-fos、c-myc和c-jun即刻早期基因表达的影响.设计、时间及地点:电刺激干预的体外细胞学观察,于2006-10/2007-01在同济医院矫形外科实验室完成.材料:清洁级健康Sprague-Dawley大鼠6只,由华中科技大学同济医学院动物实验中心提供.电磁场发生器由海军工程大学电机系设计制造.方法:贴壁筛选法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,传至第4代按2×103个/孔接种,每孔均加入200 μL含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基,分为2组,对照组细胞置于普通培养箱中培养3 d,暴磁组在培养箱中安装电磁场发生器,频率50 Hz、强度1 mT的正弦波,每次刺激30 min,间隔11.5 h,2次/d,共刺激5 d.主要观察指标:MTT法检测细胞增殖活性,考马斯亮蓝法测定细胞碱性磷酸酶活性,RT-PCR检测即刻早期基因的表达.结果:电磁场刺激3 d后,暴磁组MTT产物吸光度值明显高于对照组(P < 0.01);电磁场刺激5 d后,暴磁组细胞碱性磷酸酶活性明显高于对照组(P < 0.01).与对照组比较,暴磁组c-fos和c-myc基因表达均有不同水平的上调(P < 0.01),c-jun基因无明显变化.结论:电磁场刺激可上调骨髓间充质干细胞中c-fos和c-myc即刻早期基因的表达,可能通过该途径来促进骨髓间充质干细胞的增殖活性,诱导其向成骨细胞分化.
배경:세포수자격후즉각조기기인재세포핵내쾌속표체,기편마적핵단백작위반식작용인자,통과격활모사기인적전록이조공세포적증식、분화등생물학행위.목적:관찰전자장자격대대서골수간충질간세포c-fos、c-myc화c-jun즉각조기기인표체적영향.설계、시간급지점:전자격간예적체외세포학관찰,우2006-10/2007-01재동제의원교형외과실험실완성.재료:청길급건강Sprague-Dawley대서6지,유화중과기대학동제의학원동물실험중심제공.전자장발생기유해군공정대학전궤계설계제조.방법:첩벽사선법체외분리배양대서골수간충질간세포,전지제4대안2×103개/공접충,매공균가입200 μL함10%태우혈청적DMEM-F12배양기,분위2조,대조조세포치우보통배양상중배양3 d,폭자조재배양상중안장전자장발생기,빈솔50 Hz、강도1 mT적정현파,매차자격30 min,간격11.5 h,2차/d,공자격5 d.주요관찰지표:MTT법검측세포증식활성,고마사량람법측정세포감성린산매활성,RT-PCR검측즉각조기기인적표체.결과:전자장자격3 d후,폭자조MTT산물흡광도치명현고우대조조(P < 0.01);전자장자격5 d후,폭자조세포감성린산매활성명현고우대조조(P < 0.01).여대조조비교,폭자조c-fos화c-myc기인표체균유불동수평적상조(P < 0.01),c-jun기인무명현변화.결론:전자장자격가상조골수간충질간세포중c-fos화c-myc즉각조기기인적표체,가능통과해도경래촉진골수간충질간세포적증식활성,유도기향성골세포분화.