中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2008年
9期
4-8
,共5页
姚欣%刘玉芬%唐高霞%刘洪雨
姚訢%劉玉芬%唐高霞%劉洪雨
요흔%류옥분%당고하%류홍우
猪甘露聚糖结合凝集素A%基因克隆%载体构建%原核表达
豬甘露聚糖結閤凝集素A%基因剋隆%載體構建%原覈錶達
저감로취당결합응집소A%기인극륭%재체구건%원핵표체
从长白猪肝脏细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增pMBL-A基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,得到猪甘露聚糖结合凝集素A(poreine mannan-binding lectin A,pMBL-A)基因.再亚克隆到pPROEXHTb表达载体上,构建重组表达质粒.将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌中诱导表达重组pMBL-A蛋白,通过SDS-PAGE检测蛋白的表达情况.结果成功扩增得到包括完整开放读码框长为875bp的全长cDNA片段,并原核表达了重组蛋白,为进一步研究该蛋白的遗传特征以及为猪遗传育种方面的研究提供依据.
從長白豬肝髒細胞中提取總RNA,通過RT-PCR法擴增pMBL-A基因,與pMD18-T載體連接進行TA剋隆,得到豬甘露聚糖結閤凝集素A(poreine mannan-binding lectin A,pMBL-A)基因.再亞剋隆到pPROEXHTb錶達載體上,構建重組錶達質粒.將暘性重組錶達質粒轉化到大腸桿菌中誘導錶達重組pMBL-A蛋白,通過SDS-PAGE檢測蛋白的錶達情況.結果成功擴增得到包括完整開放讀碼框長為875bp的全長cDNA片段,併原覈錶達瞭重組蛋白,為進一步研究該蛋白的遺傳特徵以及為豬遺傳育種方麵的研究提供依據.
종장백저간장세포중제취총RNA,통과RT-PCR법확증pMBL-A기인,여pMD18-T재체련접진행TA극륭,득도저감로취당결합응집소A(poreine mannan-binding lectin A,pMBL-A)기인.재아극륭도pPROEXHTb표체재체상,구건중조표체질립.장양성중조표체질립전화도대장간균중유도표체중조pMBL-A단백,통과SDS-PAGE검측단백적표체정황.결과성공확증득도포괄완정개방독마광장위875bp적전장cDNA편단,병원핵표체료중조단백,위진일보연구해단백적유전특정이급위저유전육충방면적연구제공의거.
