中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2009年
7期
845-847
,共3页
金宁%张灵%肖博晗%孔祥波
金寧%張靈%肖博晗%孔祥波
금저%장령%초박함%공상파
膀胱癌%PDECGF%RNA干扰%凋亡
膀胱癌%PDECGF%RNA榦擾%凋亡
방광암%PDECGF%RNA간우%조망
目的 探讨RNA干扰技术沉默血小板源性内皮生长因子基因(platelet-derived endothelial cell growth factor, PDECGF)表达诱导人膀胱癌细胞凋亡的机制.方法 针对人PDECGF mRNA序列设计合成编码干扰RNA (siRNA) 的DNA模板, siRNA;构建含RNA聚合酶启动子Ⅲ转录载体pRNAT-U6/Neo并能形成发夹结构小干扰RNA(siRNA)的psiPDECGF质粒;用其转染人膀胱癌T24细胞株,采用RT-PCR、Western 印迹法观察转染前后PDECGF基因及相关基因表达变化,采用凋亡DNA琼脂糖凝胶电泳及吖啶橙/溴化乙啶染色法观察细胞凋亡.结果 显示PDECGF siRNA对膀胱癌T24细胞中PDECGF基因表达产生明显抑制作用;转染psiPDECGF-2细胞组PDECGF mRNA水平明显降低,上述重组质粒可诱导T24细胞凋亡,同时caspase-3、p53蛋白水平明显增高.结论 证实psiPDECGF-2可抑制PDECGF在T24细胞的表达,诱导肿瘤细胞凋亡.其机制与caspase-3、p53蛋白水平表达增高有关.
目的 探討RNA榦擾技術沉默血小闆源性內皮生長因子基因(platelet-derived endothelial cell growth factor, PDECGF)錶達誘導人膀胱癌細胞凋亡的機製.方法 針對人PDECGF mRNA序列設計閤成編碼榦擾RNA (siRNA) 的DNA模闆, siRNA;構建含RNA聚閤酶啟動子Ⅲ轉錄載體pRNAT-U6/Neo併能形成髮夾結構小榦擾RNA(siRNA)的psiPDECGF質粒;用其轉染人膀胱癌T24細胞株,採用RT-PCR、Western 印跡法觀察轉染前後PDECGF基因及相關基因錶達變化,採用凋亡DNA瓊脂糖凝膠電泳及吖啶橙/溴化乙啶染色法觀察細胞凋亡.結果 顯示PDECGF siRNA對膀胱癌T24細胞中PDECGF基因錶達產生明顯抑製作用;轉染psiPDECGF-2細胞組PDECGF mRNA水平明顯降低,上述重組質粒可誘導T24細胞凋亡,同時caspase-3、p53蛋白水平明顯增高.結論 證實psiPDECGF-2可抑製PDECGF在T24細胞的錶達,誘導腫瘤細胞凋亡.其機製與caspase-3、p53蛋白水平錶達增高有關.
목적 탐토RNA간우기술침묵혈소판원성내피생장인자기인(platelet-derived endothelial cell growth factor, PDECGF)표체유도인방광암세포조망적궤제.방법 침대인PDECGF mRNA서렬설계합성편마간우RNA (siRNA) 적DNA모판, siRNA;구건함RNA취합매계동자Ⅲ전록재체pRNAT-U6/Neo병능형성발협결구소간우RNA(siRNA)적psiPDECGF질립;용기전염인방광암T24세포주,채용RT-PCR、Western 인적법관찰전염전후PDECGF기인급상관기인표체변화,채용조망DNA경지당응효전영급아정등/추화을정염색법관찰세포조망.결과 현시PDECGF siRNA대방광암T24세포중PDECGF기인표체산생명현억제작용;전염psiPDECGF-2세포조PDECGF mRNA수평명현강저,상술중조질립가유도T24세포조망,동시caspase-3、p53단백수평명현증고.결론 증실psiPDECGF-2가억제PDECGF재T24세포적표체,유도종류세포조망.기궤제여caspase-3、p53단백수평표체증고유관.
