CAJ | 학술논문

[目的] 构建重组乙酰胆碱受体亚单位-BirA识别多肽序列基因(pcDNA 3.1-AChRα-BirA),并对其进行真核基因表达. [方法] 设计引物生物素蛋白连接酶(BirA)识别多肽序列基因,将载体pcDNA 3.1-AChRα-BirA识别多肽序列基因连接,并用EcoRⅤ单酶切检查BirA识别多肽序列基因插入的正确性,并测定序列进行验证.将构建成功的载体在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上进行表达,经激光扫描共聚焦显微镜验证其产物. [结果] 电泳检查可见大小为63 bp的条带,经测定序列验证了插入的基因序列为BirA识别多肽序列基因;转染后经激光扫描共聚焦显微镜观察到CHO细胞膜上的绿色荧光. [结论] 成功构建了AChRα-BirA识别多肽序列基因重组载体,并可在CHO细胞中较好地表达.
[목적] 구건중조을선담감수체아단위-BirA식별다태서렬기인(pcDNA 3.1-AChRα-BirA),병대기진행진핵기인표체. [방법] 설계인물생물소단백련접매(BirA)식별다태서렬기인,장재체pcDNA 3.1-AChRα-BirA식별다태서렬기인련접,병용EcoRⅤ단매절검사BirA식별다태서렬기인삽입적정학성,병측정서렬진행험증.장구건성공적재체재중국창서란소(CHO)세포상진행표체,경격광소묘공취초현미경험증기산물. [결과] 전영검사가견대소위63 bp적조대,경측정서렬험증료삽입적기인서렬위BirA식별다태서렬기인;전염후경격광소묘공취초현미경관찰도CHO세포막상적록색형광. [결론] 성공구건료AChRα-BirA식별다태서렬기인중조재체,병가재CHO세포중교호지표체.